1、β-防御素和Cathelicidins是家禽體內兩個主要抗菌肽家族，在家禽抗感染先天免疫中發(fā)揮著重要的作用。益生性鼠李糖乳桿菌MLGA及其完整細胞壁肽聚糖可促進雞免疫細胞和腸組織-防御素9(-defensin9，AvBD9)基因的表達。然而有關鼠李糖乳桿菌MLGA在肉雞體內發(fā)揮抗感染作用和防御素表達的調控機制仍未完全闡明。本試驗從雞體內開展研究，探討肉雞日糧中鼠李糖乳桿菌MLGA適宜添加量，并在此基礎上探討感染雞腸炎沙門氏菌條件下曰糧添

2、加鼠李糖乳桿菌MLGA對雞天然免疫功能的影響，初步闡明鼠李糖乳桿菌MLGA發(fā)揮抗感染作用的途徑和機制，為益生菌的篩選和推廣應用提供更加堅實的理論基礎和試驗依據。
　　試驗一:選用200羽1日齡艾拔益加肉雞(AA肉雞)白羽公肉仔雞隨機分成5組，每組4個重復，每個重復10羽。5個處理組為對照組、抗生素組和3個不同水平鼠李糖乳桿菌MLGA試驗組，對照組飼喂不含任何抗生素的基礎日糧，抗生素組在基礎日糧的基礎上添加桿菌肽鋅40mg/kg，試

3、驗組在基礎日糧的基礎上分別添加1×109cfu/kg、1×1010cfu/kg和1×1011cfu/kg鼠李糖乳桿菌MLGA，飼養(yǎng)周期為21d。在試驗開始的第1d、第14d和第21d，以重復為單位稱量各組雞只的空腹重并每天記錄飼料投料量和剩余量，以計算平均日采食量、平均日增重和料重比。在14d和21d時，從每個重復組隨機取2只雞翅靜脈采血各10mL，并立即致死分離脾臟、法氏囊和胸腺，無菌條件下取出盲腸內容物，用干凈的載玻片刮取空腸中段腸

4、黏膜。用于測定血清細胞因子、腸黏膜sIgA、免疫器官指數和盲腸內容物中大腸桿菌的載菌量。結果顯示:日糧中添加1×109cfu/kg、1×1010cfu/kg和1×1011cfu/kg三個水平的鼠李糖乳桿菌MLGA均能顯著降低1～21日齡肉雞料重比，改善肉雞的生長性能(P＜0.05)。曰糧添加鼠李糖乳桿菌MLGA對肉雞血清免疫球蛋白和腸黏膜sIgA的含量有不同程度的提高作用，添加1×1010cfu/kg鼠李糖乳桿菌MLGA能顯著提高血清I

5、L-10含量，降低IL-6含量(P＜0.05)，對機體免疫和抗炎反應起著重要的作用。添加1×1010cfu/kg和1×1011 cfu/kg鼠李糖乳桿菌MLGA可顯著抑制盲腸內大腸桿菌的增殖(P＜0.05)。綜合以上指標，肉雞日糧鼠李糖乳桿菌MLGA適宜的添加量為1×1010cfu/kg。
　　試驗二:選取1日齡AA白羽公肉雞雞苗120羽，隨機分為3個處理組，每個組4個重復，每個重復10羽。3個處理組分為對照組，腸炎沙門氏菌組和持

6、續(xù)飼喂鼠李糖乳桿菌MLGA1×1010 cfu/kg并感染腸炎沙門氏菌組，飼養(yǎng)周期為21d。對照組飼喂不含任何抗生素的基礎日糧，感染組于6日齡8:00鋤經食道灌服1×106 cfu雞腸炎沙門氏菌。在7日齡、10日齡、14日齡和21日齡每個重復隨機抽取1只雞，心臟采血，分離血清，用于測定細胞因子。剪取十二指腸、回腸和空腸中段約3cm，經常規(guī)石蠟切片，測定其絨毛長度和隱窩深度，并計算絨毛長度和隱窩深度的比值。無菌采取肝臟和盲腸內容物，用于測

7、定其腸炎沙門氏菌的載菌量。結果顯示:肉雞感染腸炎沙門氏菌前后持續(xù)喂服鼠李糖乳桿菌MLGA能夠顯著降低血清中C-反應蛋白（C-reactive protein，CRP）、趨化因子RANTES、白細胞介素8(Interleukin-8，IL-8)和腫瘤壞死因子α（Tumor Necrosis Factorα，TNF-α）含量，并提高轉化生長因子-β1（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）的含量(P＜0.

8、05)。鼠李糖乳桿菌MLGA極顯著降低21d肉雞盲腸內容物中沙門氏菌的含量(P＜0.01)，同時能夠顯著改善肉雞感染腸炎沙門氏菌后空腸的絨毛長度，提高絨毛長度和隱窩深度的比值(P＜0.05)，提高肉雞對腸炎沙門氏菌的抵抗力。
　　試驗三:試驗動物和分組同試驗二，在7日齡、10日齡、14日齡和21日齡每個重復隨機抽取1只雞，采用心臟采血法采取抗凝血4ml，用于分離外周血單個核細胞(peripheral blood mononucle

9、ar cells，PBMCs)，迅速處死后在在冰浴上剪取脾臟、肝臟、法氏囊、空腸、回腸和盲腸，應用PT-PCR方法檢測樣品中Toll樣受體2(Toll-likereceptor2,TLR2)、NOD1(nucleotidebinding oligomerzation domain,NOD)、嗜中性白細胞堿性磷酸酶3(neutrophilic alkaline phosphatase3，NALP3)、AvBD9和Cath-B1(Cathe

10、licidin-B1)基因的mRNA相對表達量。結果表明:肉雞感染腸炎沙門氏菌后，鼠李糖乳桿菌能不同程度地促進感染腸炎沙門氏菌的肉雞組織和PBMC中TLR2、Cath-B1和AvBD9 mRNA的表達，提高肉雞抗腸炎沙門氏感染免疫功能，且本試驗結果表明肉雞可能通過TLR2介導Cath-B1的表達。
　　綜上所述，日糧中添加鼠李糖乳桿菌MLGA可顯著提高肉仔雞的生產性能，同時能提高肉仔雞血清中免疫蛋白水平和抗炎細胞因子含量。持續(xù)喂服