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文檔簡介
1、藍眼菊(Osteospermum hybrida),為菊科,藍眼菊屬植物,是一種新興的地被、盆栽花卉。它花量大、花色艷麗,株叢豐滿,具有很高的觀賞價值和廣闊的市場開發(fā)前景。但是由于它不耐夏季高溫,耐寒力中等,使其在我國城市綠化中的使用、推廣受到限制。針對該問題,本研究利用組織培養(yǎng)技術在前人的基礎上優(yōu)化藍眼菊的再生體系,用農桿菌介導法建立藍眼菊遺傳轉化體系,為藍眼菊新品種選育、改良工作創(chuàng)造條件。主要研究結果如下:
在前人研究
2、的基礎上優(yōu)化了藍眼菊的再生體系,本論文用三種藍眼菊進行對比實驗,分別為‘花葉’、‘107’、‘23’,間接再生葉片誘導愈傷組織的最適培養(yǎng)基分別為‘花葉’MS+BA1.0 mg/L+MAA0.5/0.75 mg/L,分化率為98.06%;‘107’MS+BA1.0 mg/L+NAA0.5/0.75 mg/L,分化率為1000/0;‘23’MS+BA1.0 mg/L+IBA0.5/1.0 mg/L,分化率為92.39%;愈傷組織誘導不定芽最
3、適培養(yǎng)基‘花葉’、‘107’、‘23’均為MS+BA1.0 mg/L+NAA0.5/1.0 mg/L,其中分化率分別為47.62%、44.76%、40.29%;直接再生葉片直接誘導不定芽最適培養(yǎng)基‘花葉’MS+BAl.0 mg/L+IBA0.6 mg/L,最適外植體為幼葉,分化率為49.43%;‘107’為MS+BA1.0 mg/L+IBA0.6 mg/L,最適外植體為幼葉,分化率為48.53%;‘23’為MS+BA1.0 mg/L+N
4、AA0.5 mg/L,最適外植體為幼葉或葉盤,分化率為48.51%;當繼代次數超過6代時,最適外植體為葉盤,誘導率最高達94.28%;不定芽的增殖培養(yǎng),當繼代次數6代內時,‘花葉’、‘107’最適合的增值培養(yǎng)基為MS+BA1.0 mg/L+IBA0.5 mg/L,‘23’為MS+BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L;當繼代次數超過6次后,激素濃度則應降低,否則玻璃化程度非常嚴重。生根培養(yǎng)基本培養(yǎng)基為1/2MS,‘107’最適生根
5、培養(yǎng)基1/2MS+NAA0.3 mg/L而‘花葉’、‘23’為1/2MS+NAA0.5 mg/L,研究還發(fā)現用MS培養(yǎng)基培養(yǎng)4w以后藍眼菊生根率可達到100%。
初步藍眼菊轉化體系的建立,以‘花葉’為主要材料,用葉片與愈傷組織兩種材料,采用葉盤法,預培養(yǎng)、共培養(yǎng)培養(yǎng)基:葉片MS+BA1.0 mg/L+IBA0.8mg/L;愈傷組織為:MS+BA1.0 mg/L+NAA0.6 mg/L;篩選培養(yǎng)基葉片MS+BA1.0mg/L
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