1、蘿卜(Raphanus sativus L.)是起源于中國(guó)的一種重要十字花科蔬菜作物，種質(zhì)資源豐富，栽培歷史悠久，具有較高的食用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。由寄生霜霉(Hyalonosporanparasitica)引起的霜霉病是十字花科作物上的一種世界性病害。近幾年，蘿卜霜霉病發(fā)生嚴(yán)重，尤其是春秋季保護(hù)地栽培溫度適宜且潮濕的環(huán)境下更易發(fā)生，并且在整個(gè)生長(zhǎng)期都容易發(fā)生，嚴(yán)重影響了蘿卜的產(chǎn)量品質(zhì)。因此，提高霜霉病抗性成為蘿卜重要育種目標(biāo)之一。目前十字

2、花科蔬菜霜霉病的研究主要集中在蕓薹屬蔬菜作物上。
　　 本研究在研究室建立蘿卜霜霉病抗性鑒定、抗性生理與遺傳研究基礎(chǔ)上，開(kāi)展霜霉病抗性分子標(biāo)記與Rs-AFPs基因表達(dá)分析，主要結(jié)果如下：⑴以蘿卜抗感材料NAU-dhp08×NAU-qtbjq-06組合的F2分離群體為試材，通過(guò)人工接種鑒定，采用混合分離分析法(BSA)，采用高抗單株和高感單株分別構(gòu)建抗感池，篩選了RAPD、EST-SSR、SRAP、ISSR和RGA引物。篩選了18

3、66個(gè)引物或引物組合，通過(guò)F2單株驗(yàn)證，經(jīng)x2測(cè)驗(yàn)后符合孟德?tīng)栠z傳定律，遺傳作圖顯示，與蘿卜霜霉病抗性基因緊密連鎖的標(biāo)記中，遺傳距離小于10cM的有3個(gè)，分別是Me7/em10400(7.7 cM)，NAUISSR862700(5.9cM)與Em9/ga24370(2.3 cM)，最近的標(biāo)記距抗性位點(diǎn)的距離為2.3cM，即Em9/ga24370。研究結(jié)果為蘿卜霜霉病抗性標(biāo)記輔助選擇(Markerassisted selection，MA

4、S)，霜霉病抗性育種與新品種選育工作奠定了基礎(chǔ)。⑵根據(jù)蘿卜中已報(bào)道的抗菌肽(Rs-AFPs)基因序列設(shè)計(jì)引物，以蘿卜‘NAU-dhp08’的葉片為試材，采用PCR法進(jìn)行擴(kuò)增，獲得4種Rs-AFPs的基因組DNA，分別命名為Rs-AFP1、Rs-AFP2、Rs-AFP3和Rs-AFP4；獲得的4條Rs-AFPs序列分別與芥菜Bj-AFP1基因(AB537492.1)(98％)、芥菜防御酶基因(DQ191751.1)(93％)、甘藍(lán)防御酶基

5、因(EF423802.1)(96％)和大白菜防御酶基因(AF528180.1)(97％)高度同源。采用RT-PCR法獲得Rs-AFP3和Rs-AFP4的cDNA序列，其氨基酸分別與甘藍(lán)，甘藍(lán)型油菜同源性很高。半定量PCR分析表明，Rs-AFP3基因在接種霜霉病后6h表達(dá)量最高；Rs-AFP4基因在接種后有兩次表達(dá)高峰，分別是在6h和36h時(shí)表達(dá)量最高。研究結(jié)果對(duì)于進(jìn)一步揭示抗菌肽基因在蘿卜抗霜霉病反應(yīng)中的作用機(jī)制與生物學(xué)功能具有重要意義