不同類型水稻成熟胚再生體系的建立及其生理生化特性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、高頻再生體系是水稻遺傳轉化的基礎,本文在武育粳3號研究的基礎上,用生產上具有重要應用價值的不同類型的水稻品種成熟胚為外植體材料,比較研究了10個粳稻,9個秈稻和11個雜交稻組合在不同培養(yǎng)基中的出愈、分化和再生等組織培養(yǎng)力表現(xiàn),以期建立一個適應性廣的高頻再生體系.同時對出愈率不同的不同類型的水稻成熟胚愈傷組織誘導過程中的生理生化特性及其超微結構進行比較研究,為探討水稻愈傷組織分化機理提供理論依據。主要研究結果如下:
   (1)以

2、武育粳3號的成熟胚作為研究材料,確定了水稻組織培養(yǎng)的最佳基本培養(yǎng)基(M8)、最佳蔗糖濃度(30 g/L)、最佳2,4-D濃度(2 mg/L),以及研究了不同激素配比對誘導胚性愈傷組織的影響,研究發(fā)現(xiàn),在使用2 mg/L2,4-D,0.5 mg/L6-BA和0.5 mg/LKT激素組合時,激素配比為4:1:1,可獲得87.5%出愈率。
   (2)以M8為基本培養(yǎng)基,在添加30 g/L蔗糖、8 g/L瓊脂和2 mg/L,2,4-D

3、相同成分的基礎上,供試粳稻材料單獨添加較低濃度的細胞分裂素,即0.3 mg/L6-BA可獲得較高的出愈率,出愈率在13.0%-89.2%之間;而供試秈稻材料則在添加2 mg/L6-BA和0.5 mg/L KT兩種細胞分裂素的基礎上,再添加1 mg/L NAA生長素類激素,可明顯提高出愈率,出愈率在9.1%-100%之間;而11個偏秈型雜交稻則表現(xiàn)在添加1 mg/L6-BA和1 mg/L KT兩種細胞分裂素,即可獲得較高的出愈率,出愈率在

4、40.0%-86.3%之間。在此基礎上,在添加了0.5 mg/L2,4-D和1 mg/L6-BA的MS分化培養(yǎng)基(粳稻)以及0.2 mg/L2,4-D和0.5 mg/L6-BA(秈稻和雜交稻)的分化培養(yǎng)基上,可分別獲得4.5%-59.5%(粳稻)、3.6%-87.5%(秈稻)和17.2%-43.2%(雜交稻)的植株再生率。
   (3)選取出愈率顯著不同的粳稻(揚輻粳7號、武育粳3號和蘇滬香粳)和秈稻(揚輻秈6號、恢76和黃華占

5、)品種,接種于不同的愈傷組織誘導的最適培養(yǎng)基中,分別取接種不同天數不同材料的愈傷組織,研究其愈傷誘導過程中可溶性蛋白含量,丙二醛(MDA)以及不同抗氧化酶(超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT))的活性變化。研究表明,這些蛋白含量和酶活性與出愈率、分化率、褐化率及再生率有一定的相關性,其中CAT活性均與不同類型水稻出愈率成反比,可作為一個出愈率差異的標志酶。
   (4)選取出愈率顯著不同的粳稻(揚

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