1、由稻瘟病菌(Magnaporthegrisea,無(wú)性世代為Pyricularia oryzae)引起的稻瘟病是水稻上危害最為嚴(yán)重的真菌病害之一,每年都給水稻生產(chǎn)帶來(lái)重大的經(jīng)濟(jì)損失.稻瘟菌作為一種模式病原真菌,對(duì)其生物學(xué)及分子生物學(xué)方面都得到了廣泛深入的研究.稻瘟菌致病分子機(jī)制的研究不僅為病害的防治提供理論基礎(chǔ),也為其原真菌的研究提供借鑒作用.該研究從稻瘟病菌野生型菌株P(guān)131的REMI轉(zhuǎn)化體庫(kù)中篩選并獲得的一個(gè)菌落生長(zhǎng)緩慢型突變體K13

2、04,通過(guò)遺傳雜交分析,確定其表型的改變是由于外源質(zhì)粒pUCATPH的插入引起的,該研究對(duì)突變體K1304的一些生物學(xué)性狀與野生型菌株P(guān)131進(jìn)行了比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)K1304的菌落生長(zhǎng)速度為P131的60﹪,其產(chǎn)孢量為P131的1/3.突變體K1304的在洋蔥皮上的萌發(fā)、附著胞形成、侵染釘?shù)漠a(chǎn)生以及侵染性菌絲的擴(kuò)展均要滯后于野生型菌株P(guān)131,但最終形成的比率基本一致,因此,二者對(duì)水稻致病性差異不明顯.為了進(jìn)一步克隆稻瘟菌菌落生長(zhǎng)相關(guān)基因

3、,以插入質(zhì)粒pUCATPH為探針,對(duì)K1304進(jìn)行基因組Southern blot,表明該質(zhì)粒在突變體K1304中為一個(gè)位點(diǎn)兩個(gè)拷貝串聯(lián)重復(fù)插入,通過(guò)質(zhì)粒外的酶HindⅢ拯救得到質(zhì)粒KH3,將拯救的側(cè)翼序列與已公布的稻瘟菌基因組全序列進(jìn)行比較,經(jīng)分析質(zhì)粒插入在contig2.288上的6604位點(diǎn),用包含該插入位點(diǎn)的基因構(gòu)建互補(bǔ)載體,進(jìn)行互補(bǔ)驗(yàn)證,并未恢復(fù)該基因的功能.根據(jù)Southern blot及該contig上的酶切位點(diǎn)分析,可能