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![細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)考試重點(diǎn)_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-8/29/8/abaac605-b459-411d-9850-ab73a819f59f/abaac605-b459-411d-9850-ab73a819f59f1.gif)
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1、名詞解釋?zhuān)?.群體倍增時(shí)間群體倍增時(shí)間:細(xì)胞指數(shù)增長(zhǎng)期時(shí),細(xì)胞群倍增所需的時(shí)間。是由于表示群體細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)期內(nèi)細(xì)胞分裂活動(dòng)的程度,是判斷細(xì)胞生長(zhǎng)是否旺盛的重要指標(biāo)。2.接觸抑制接觸抑制(contactinhibition):細(xì)胞相互接觸后失去運(yùn)動(dòng)的現(xiàn)象。3.密度抑制密度抑制(densityinhibition):由于細(xì)胞密度過(guò)大,培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)耗盡,代謝產(chǎn)物過(guò)多和生存空間消失所引起的細(xì)胞增殖的抑制現(xiàn)象。4.腫瘤干細(xì)胞腫瘤干細(xì)胞(tu(tum
2、mstemstemcellscells,TSC)TSC)表現(xiàn)為一種特殊類(lèi)型的干細(xì)胞,具備高度增殖能力與自我更新能力,也具備多向分化的潛能。TSC增殖過(guò)程中,通過(guò)不均一分裂,一個(gè)TSC分裂形成一個(gè)新的TSC和另一個(gè)可最終分化為包括腫瘤細(xì)胞在內(nèi)的各種細(xì)胞的子細(xì)胞,其結(jié)果是維持TSC數(shù)目穩(wěn)定并產(chǎn)生腫瘤。5.細(xì)胞匯合細(xì)胞匯合(Confluent)(Confluent):指細(xì)胞增殖生長(zhǎng)相互連接成片占據(jù)所有底物面積現(xiàn)象。6.飽和密度(Saturat
3、iondensity):在特殊培養(yǎng)條件下,每平方厘米(單層培養(yǎng))或每毫升細(xì)胞懸液內(nèi)可達(dá)到的最大細(xì)胞數(shù)。7.二倍體細(xì)胞系或株(Diploidcelllinestrain):具有二倍體染色體數(shù)的細(xì)胞系或株。8.二倍體(Diploid):指雙倍數(shù)的染色體數(shù)或具有此數(shù)的細(xì)胞系。9.組織工程組織工程:是應(yīng)用生命科學(xué)和工程學(xué)的原則及方法,在正確認(rèn)識(shí)正常及病理兩種狀態(tài)下的組織結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上,研究、開(kāi)發(fā)用于修復(fù)、維護(hù)、促進(jìn)人體各種組織或器官損傷
4、后的功能和形態(tài)的生物替代物的一門(mén)新興學(xué)科。10.細(xì)胞融合細(xì)胞融合(Cellfusion):指兩個(gè)獨(dú)立的細(xì)胞借媒介物(PEG等)融合成雜種細(xì)胞的過(guò)程。11.細(xì)胞富集細(xì)胞富集:當(dāng)細(xì)胞分離純化并不完全徹底,培養(yǎng)物中能達(dá)到以某種細(xì)胞為主(占絕大多數(shù))的程度。12.三維培養(yǎng)三維培養(yǎng):把細(xì)胞懸液接種在一定立體形態(tài)的支架上,使細(xì)胞生長(zhǎng)在三維環(huán)境中的培養(yǎng)方法。13.平衡鹽溶液平衡鹽溶液(balancedsaltsolutionBSS):簡(jiǎn)稱(chēng)鹽溶液,集緩
5、沖液的緩沖能力、生量鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體。兼具緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度、維持滲透壓、同時(shí)供給細(xì)胞生存所需的能量和無(wú)機(jī)離子成分的作用。14.生長(zhǎng)基質(zhì)生長(zhǎng)基質(zhì)(growthsubstratum):培養(yǎng)器皿表面包被的一層能改善生長(zhǎng)表面的特性,促進(jìn)細(xì)胞粘附和貼壁的物質(zhì)。15.去分化(去分化(dedifferentiation):指已成熟的細(xì)胞和組織倒退分化,返回原始幼稚的狀態(tài)。16.消化液:消化液:在原代細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞傳代時(shí)
6、,都要用消化液,最常用的是胰蛋白酶和二乙烯四乙酸二鈉(EDTA),其次是一些特殊的組織細(xì)胞培養(yǎng)用的各型膠原酶。在原代細(xì)胞培養(yǎng)中,使用消化液從組織塊中分離(散)出單個(gè)的細(xì)胞;在進(jìn)行細(xì)胞傳代時(shí),消化液使細(xì)胞脫離生長(zhǎng)表面并離散成單個(gè)細(xì)胞。17.消毒disinfection殺死物體上病原微生物的方法。滅菌滅菌sterilizationterilization殺滅物體上所有微生物的方法,包括病原微生物和非病原微生物、繁殖體和芽胞。18.轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
7、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系:指細(xì)胞發(fā)生了不可逆轉(zhuǎn)的遺傳改變而引起恒定的表型改變的細(xì)胞系。19.雜交瘤技術(shù)雜交瘤技術(shù):又稱(chēng)單克隆抗體制備技術(shù),是指建立雜交瘤細(xì)胞系的技術(shù),通常指B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù),即將骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,以建立可以分泌單一性抗體的雜交瘤細(xì)胞系的技術(shù)。20.指由一個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的,只識(shí)別一種抗原決定簇的均質(zhì)抗體。背景相同的群體,可以保存。3)實(shí)際意義:組織(細(xì)胞)培養(yǎng)對(duì)醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)的意義①培養(yǎng)的組織器官或細(xì)胞,能再一定范
8、圍和程度上反映生命活動(dòng)規(guī)律和機(jī)體功能特點(diǎn)。培養(yǎng)的組織器官或細(xì)胞,能再一定范圍和程度上反映生命活動(dòng)規(guī)律和機(jī)體功能特點(diǎn)。培養(yǎng)的細(xì)胞為生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)各種研究奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。如藥物篩選,療劑評(píng)價(jià),新生物制品研發(fā),研究病毒及其他微生物,發(fā)現(xiàn)新的傳染因子,組織工程中的支撐技術(shù)等。②細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為商品化生物技術(shù)產(chǎn)品的核心。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為商品化生物技術(shù)產(chǎn)品的核心。如目前可提供的產(chǎn)品,病毒疫苗:口蹄疫、狂犬疫苗和乙肝疫苗等;非抗體型免疫調(diào)
9、節(jié)劑:干擾素、白介素和集落刺激因子等;多肽生長(zhǎng)因子:表皮生長(zhǎng)因子和神經(jīng)生長(zhǎng)因子等;酶類(lèi):組織型纖溶酶原激活劑;激素:EPO和促黃體生成素等;殺蟲(chóng)劑:桿狀病毒;腫瘤特異抗原;癌胚抗原;通過(guò)雜交瘤生產(chǎn)的各種單克隆抗體;細(xì)胞本身(如干細(xì)胞);皮膚重植等。4)組織(細(xì)胞)培養(yǎng)的局限性:細(xì)胞(組織)培養(yǎng),包括器官培養(yǎng)終歸是離體培養(yǎng),缺少生物整體的嚴(yán)密聯(lián)系,不能代表整個(gè)機(jī)體。在進(jìn)行醫(yī)學(xué)生物實(shí)驗(yàn)過(guò)程及對(duì)結(jié)果的評(píng)估都必須考慮這些。3.3.簡(jiǎn)述細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)
10、程中如何進(jìn)行微生物污染防治簡(jiǎn)述細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中如何進(jìn)行微生物污染防治1)把好每一個(gè)關(guān)口,盡可能禁止任何有污染的物品進(jìn)入培養(yǎng)操作環(huán)節(jié);2)抗生素:一般用常用量的5~10倍作沖擊療法。用藥24~48h后,再換常規(guī)培養(yǎng)液。3)加溫處理:根據(jù)支原體對(duì)熱敏感的特點(diǎn),將受支原體污染的細(xì)胞放置在41℃作用5~10h,最長(zhǎng)不超過(guò)18h后,以殺滅支原體。4)動(dòng)物體內(nèi)接種:將支原體污染的細(xì)胞接種在同種動(dòng)物的皮下或腹腔,借動(dòng)物體內(nèi)的免疫系統(tǒng)消滅支原體。待一定時(shí)
11、間后取出細(xì)胞,做原代培養(yǎng)再進(jìn)行繁殖。4.4.試述目前體外細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用最多的天然培養(yǎng)基類(lèi)型及其作用試述目前體外細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用最多的天然培養(yǎng)基類(lèi)型及其作用天然培養(yǎng)基(液)的種類(lèi)很多,包括生物性體液(如血清、血漿)、組織浸液(胚胎浸液)、水解乳蛋白等。1)血清:①血清中含有基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)②血清中含有激素與生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子③血清中含有促進(jìn)細(xì)胞粘附和鋪展的因子④血清中含有結(jié)合蛋白⑤血清中含有抗機(jī)械損害的非特異性保護(hù)物質(zhì)⑥血清中含有pH緩沖物
12、質(zhì)⑦血清中含有蛋白酶抑制劑2)胚胎浸出液(embryonicextract)是早期動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用的天然培養(yǎng)基,如雞胚浸出液、牛胚浸出液等。胚胎浸出液主要成分為大分子蛋白和小分子氨基酸,有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。3)水解乳蛋白(lactalbuminhydrolysate)為乳白蛋白經(jīng)蛋白酶水解的產(chǎn)物,含有富的氨基酸,是常用的天然培養(yǎng)基,可用于許多細(xì)胞系和原代細(xì)胞的培養(yǎng)。5.5.血清的優(yōu)缺點(diǎn):血清的優(yōu)缺點(diǎn):1)優(yōu)點(diǎn):①血清中含有基本的營(yíng)養(yǎng)
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