1、目的：
　　臍血間充質干細胞存在于人臍帶血中，具有分化能力強、感染性疾病檢出率低和對供體無損害等優(yōu)勢，在一定條件下可分化為心肌細胞、神經(jīng)細胞、軟骨細胞、骨細胞等，可用于多種疾病的治療。MicroRNA（miRNA）是一類由內源性基因編碼的長度約為18-24個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子，能夠參與細胞的多種生理過程，例如細胞增殖、分化、凋亡以及腫瘤形成。本課題旨在研究和探索miR-21對人臍血MSCs增殖和轉化生長因子-β1表達的影

2、響。
　　方法：
　　⑴對臍血MSCs進行體外分離和培養(yǎng)，探索其生物學特性和影響其培養(yǎng)的因素；⑵利用實時PCR技術和western blotting技術測定人臍血MSCs中miR-21和轉化生長因子-β1（TGF-β1）的表達，并與miR-21高表達的腫瘤細胞進行對比；⑶利用miR-21模擬物和抑制物瞬時轉染體外培養(yǎng)的MSCs后，利用實時PCR技術和western blotting技術測定人臍血MSCs中miR-21和轉化生

3、長因子-β1（TGF-β1）的表達，探索其miR-21對人臍血MSCs增殖和TGF-β1表達的影響。
　　結果：
　　⑴在對人臍血MSCs進行培養(yǎng)時，利用胎牛血清對培養(yǎng)瓶進行覆蓋可以促進細胞的貼壁；利用含5％的DMEM-LG培養(yǎng)基進行培養(yǎng)能夠促進MSCs的增殖和純化；在對培養(yǎng)基進行換液時，半量換液的效果優(yōu)于全量換液。此外，細胞離心轉速和離心時間均可影響MSCs的增殖和純化。
　?、芃iR-21在人臍血MSCs中低表達，

4、TGF-β1在MSCs中高表達，推斷抑制miR-21表達可促進MSCs的增殖。
　?、荕iR-21模擬物可抑制MSCs增殖，同時降低TGF-β1的表達水平；miR-21抑制物則可明顯增強MSCs的活化增殖，促進TGF-β1的表達水平。因此推測miR-21可能是通過調控TGF-β1的表達水平影響人臍血MSCs的增殖活化。
　　結論：
　　MiR-21模擬物可明顯抑制人臍血MSCs的增殖，同時降低TGF-β1的表達；miR