1、植物多糖具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抗病毒等作用,且無(wú)毒副作用、資源廣泛，其多方面的生物活性已經(jīng)得到開發(fā)和應(yīng)用。其中，植物多糖因具有良好的抗氧化效果而廣泛用于美容食品、化妝品及保健品中。佛手（CitriSarcodactylisFructus）為蕓香科柑橘屬植物佛手CitrusmedicoL.Var.sarcodactylisSwingle的干燥果實(shí)。其化學(xué)成分包括黃酮類、揮發(fā)油類、香豆素類、和多糖等，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗氧化等

2、作用而具有較高的研究?jī)r(jià)值。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)佛手的研究大多主要集中在揮發(fā)油類和黃酮類上，對(duì)佛手多糖的研究主要是針對(duì)粗多糖及分子水平上的抗氧化分析和初步的結(jié)構(gòu)研究，樣本量少且缺乏能夠有效模擬體內(nèi)環(huán)境的細(xì)胞水平的抗氧化分析及構(gòu)效關(guān)系研究。據(jù)此，本文在充分總結(jié)前人關(guān)于佛手多糖研究的基礎(chǔ)上，分離純化得到一系列佛手多糖，測(cè)定佛手多糖的結(jié)構(gòu)及在細(xì)胞水平上進(jìn)行抗氧化活性測(cè)定和分析，并對(duì)抗氧化活性與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系進(jìn)行探索，希望能為佛手多糖的進(jìn)一步研究及開發(fā)

3、利用提供有價(jià)值的參考。本文的主要研究及結(jié)果如下：
　?、俜鹗执侄嗵堑闹苽浼翱寡趸钚詼y(cè)試采用傳統(tǒng)的熱水提取和乙醇逐級(jí)沉出法對(duì)佛手粗多糖進(jìn)行初步分離，對(duì)多糖的理化性質(zhì)進(jìn)行分析并利用苯酚-硫酸法測(cè)定其多糖含量，間羥基聯(lián)苯比色法測(cè)定糖醛酸含量，最后通過(guò)優(yōu)化細(xì)胞水平抗氧化（cellularantioxidantactivity,CAA)實(shí)驗(yàn)參數(shù)在細(xì)胞水平上對(duì)多糖的抗氧化能力進(jìn)行分析。結(jié)果表明水提醇沉法獲得三種粗多糖BP1、BP2和BP3，

4、理化性質(zhì)分析顯示三種粗多糖都有糖醛酸，不含有蛋白質(zhì)、核酸等雜質(zhì)；三種粗多糖的糖含量分別為17.3％、19.9%和16.6%，糖醛酸含量分別為18.5%、21.1%和22.8%；細(xì)胞水平抗氧化測(cè)試顯示三種粗多糖對(duì)HepG2細(xì)胞中DCFH轉(zhuǎn)化為DCF時(shí)產(chǎn)生的熒光值均有一定的抑制作用，表明三種多糖均有一定的抗氧化效果，通過(guò)三者的EC50值及CAA值比較得知BP3的抗氧化作用最為明顯。
　?、诜鹗志恍远嗵堑闹苽浼翱寡趸钚詼y(cè)試DEAE-

5、52纖維素柱層析法結(jié)合SephadexG-100凝膠柱層析法純化佛手粗多糖BP3，收集純化后的多糖，利用CAA法對(duì)純化后多糖的抗氧化能力進(jìn)行分析和比較。結(jié)果表明兩次柱分離之后獲得4種多糖（BP3-1、BP3-2、BP3-3和BP3-4），SephadexG-100柱層析法對(duì)四種多糖的純度進(jìn)行分析，純化后呈現(xiàn)為單一峰，表明四種多糖均是均一性多糖。CAA法分析四種進(jìn)行抗氧化活性，結(jié)果顯示四種均一性多糖對(duì)HepG2細(xì)胞中產(chǎn)生的熒光信號(hào)抑制作用

6、明顯，經(jīng)分析和比較四種多糖的EC50和CAA，結(jié)果表明其抗氧化能力為BP3-2>BP3-1>BP3-3>BP3-4。
　?、鄯鹗志恍远嗵强寡趸钚耘c其結(jié)構(gòu)之間關(guān)系探索對(duì)四種均一性多糖的糖含量及糖醛酸含量進(jìn)行計(jì)算，利用紫外光譜和紅外光譜對(duì)四種佛手多糖進(jìn)行光譜分析，高效液相色譜法分析四種多糖的單糖組成，進(jìn)而對(duì)四種均一性的抗氧化結(jié)果和其糖醛酸含量、鏈構(gòu)型及單糖組成之間的關(guān)系進(jìn)行探索研究。四種均一性多糖的糖含量分別為63.1%、18.0

7、%、21.1%和36.2%；糖醛酸含量分別為16.4%、22.8%、20.4%和33.2%；紫外光譜分析結(jié)果表明四種多糖不含有蛋白質(zhì)和核酸；紅外光譜分析顯示四種多糖中BP3-1的鏈結(jié)構(gòu)為α-型，其余三種均為β-構(gòu)型；HPLC測(cè)定單糖組成結(jié)果表明四種多糖主要由鼠李糖和葡萄糖按不同比例組成，其中BP3-1的摩爾比為鼠李糖：葡萄糖=12.45:1.00,BP3-2的摩爾比為鼠李糖：葡萄糖=18.42:1.00,BP3-3的摩爾比為鼠李糖：葡萄