1、原發(fā)性肝癌具有發(fā)病隱秘、病程漫長(zhǎng)、病死率較高等特點(diǎn)，是一種嚴(yán)重危害人類健康的惡性腫瘤病。目前，對(duì)于原發(fā)性肝癌的治療主要采取姑息性手術(shù)治療、化學(xué)藥物治療等方法，雖然這些方法具有一定的治療效果，但同時(shí)具有高風(fēng)險(xiǎn)、毒副作用大、對(duì)機(jī)體損傷嚴(yán)重等弊端。因此，現(xiàn)在亟需挖掘出效果良好的毒副作用小的天然抗腫瘤藥物并應(yīng)用到臨床治療，這些藥物的開發(fā)必將對(duì)惡性腫瘤病的防控具有重大的現(xiàn)實(shí)意義。眾多研究表明，抗腫瘤作用是植物活性多糖的一個(gè)重要的生物學(xué)活性。因此，

2、本研究以肝癌腫瘤HepG2細(xì)胞為指示細(xì)胞，系統(tǒng)研究了銀杏葉多糖（GBLP）對(duì)HepG2細(xì)胞增殖抑制作用及誘導(dǎo)凋亡的分子機(jī)制，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　本研究首先利用水提醇沉法提取GBLP，經(jīng)過脫色、脫蛋白、透析等處理獲得了純度較高的GBLP，苯酚硫酸法測(cè)得多糖含量為82.60％；紅外光譜分析顯示GBLP含有多糖類物質(zhì)的特征性吸收峰；體外抗氧化試驗(yàn)表明GBLP對(duì)DPPH?、O2-?自由基及 H2O2具有較強(qiáng)的清除能力，對(duì)鐵離子具有一定的還

3、原能力，說明了GBLP具有較好的體外抗氧化活性，并與多糖濃度呈正相關(guān)關(guān)系。
　　本研究利用不同濃度的GBLP溶液與HepG2共孵育48h，MTT試驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)GBLP溶液的濃度達(dá)到1400μg/ml時(shí)，GBLP對(duì)HepG2的抑制率達(dá)到了37.42%。運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)了細(xì)胞的凋亡率，當(dāng)GBLP溶液的濃度達(dá)到1400μg/ml時(shí)，細(xì)胞凋亡率達(dá)到了13.3%。以上結(jié)果表明GBLP對(duì)HepG2增殖具有明顯的抑制作用，且呈劑量依賴效應(yīng)

4、。采用免疫印跡技術(shù)（Western Blot）分析了細(xì)胞凋亡關(guān)鍵酶caspase-9、caspase-3、PARP的表達(dá)情況，并檢測(cè)了Bcl-2及Bax蛋白的翻譯水平和致癌蛋白Mutant-p53的表達(dá)量，結(jié)果表明，GBLP可有效的激活caspase-9、caspase-3以及切割PARP來促進(jìn)HepG2的凋亡；下調(diào)Bcl-2和上調(diào)Bax的表達(dá)量來進(jìn)一步誘導(dǎo)線粒體的損傷；減少致癌蛋白Mutant-p53的表達(dá)。綜上，GBLP對(duì)HepG2