1、文昌魚(yú)作為脊索動(dòng)物門(mén)頭索動(dòng)物亞門(mén)幸存物種,在中國(guó)主要分布在廈門(mén)、青島等少數(shù)海域,被國(guó)家列為二級(jí)瀕危保護(hù)動(dòng)物,有重大的學(xué)術(shù)價(jià)值和一定的經(jīng)濟(jì)價(jià)值.因此,有必要對(duì)它的遺傳背景進(jìn)行詳細(xì)的了解,為制定有效的保護(hù)措施提供科學(xué)的依據(jù).該實(shí)驗(yàn)首次采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)技術(shù)對(duì)青島文昌魚(yú)該群體雌雄各11條個(gè)體共22個(gè)樣本進(jìn)行遺傳多樣性檢測(cè).提取文昌魚(yú)基因組DNA后經(jīng)過(guò)預(yù)備性實(shí)驗(yàn),

2、優(yōu)化PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件,確定PCR反應(yīng)參數(shù).從40個(gè)10bp的寡聚核苷酸隨機(jī)引物(OPC、OPA各20個(gè))中篩選出17個(gè)擴(kuò)增重復(fù)性好,條帶清晰、特異性強(qiáng)、數(shù)量豐富的引物,對(duì)每個(gè)個(gè)體基因組DNA進(jìn)行了擴(kuò)增.得到RAPD產(chǎn)物的分子量在200-2200bp之間,產(chǎn)物總計(jì)127條譜帶.其中,多態(tài)位點(diǎn)60個(gè)(占47.24％),單態(tài)位點(diǎn)67個(gè)(占52.76％).各引物檢測(cè)到的RAPD位點(diǎn)數(shù)在4-11之間.計(jì)算其個(gè)體間遺傳相似系數(shù)平均為0.8656,

3、遺傳距離平均為0.1344.平均雜合度為0.1165.表明青島文昌魚(yú)群體遺傳多樣性水平較低.在文昌魚(yú)雌雄個(gè)體RAPD產(chǎn)物中,2個(gè)電泳圖譜上均能讀出明顯的雌雄差異帶.記錄為OPC-07<,250>和OPC-12<,250>.估計(jì)可能與雄性文昌魚(yú)具有異型性染色體有關(guān).這與XY型性別決定機(jī)制相吻合.將11條文昌魚(yú)雌性個(gè)體和11條文昌魚(yú)雄性個(gè)體分別作為兩個(gè)群體來(lái)研究.進(jìn)一步篩選出11個(gè)引物對(duì)雌雄群體混合DNA樣本進(jìn)行擴(kuò)增.結(jié)果表明:在個(gè)體間具有