枸杞類胡蘿卜素合成酶基因分離.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、類胡蘿卜素是自然界廣泛存在的一大類色素，具有許多重要的生物學(xué)功能，在人類營養(yǎng)中，類胡蘿卜素扮演著更重要的角色。目前，人們對增加類胡蘿卜素含量提高農(nóng)作物的營養(yǎng)價值、改善外觀品質(zhì)以及改變觀賞植物的花色有著極大的興趣。 RNA分離提取是cDNA文庫構(gòu)建重要操作。RNA操作包括RNA純化，RNA反轉(zhuǎn)錄PCR等。本實驗針對植物根部和莖部干擾成分的存在，得到其相應(yīng)適宜的提取方法：并且通過調(diào)整試劑及操作步驟從而達到理想效果。為下一步cDNA

2、文庫構(gòu)建奠定了良好的基礎(chǔ)。 以中華枸杞根、莖及葉片為材料，對比分析TRNzol提取法、異硫氰酸胍法、CTAB提取法和SDS-酚提取法提取總RNA，得到了針對枸杞根、莖及葉片等器官完整的總RNA提取方法。其中克服根部RNA難以提取的困難，得到了質(zhì)量非常高的枸杞根部總RNA。同時協(xié)助進行了cDNA文庫的構(gòu)建，得到了滴度為2.78×105 pfu/ml，重組效率為88.1％的枸杞葉片cDNA文庫。進行了cDNA保存和擴增。

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