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![類胡蘿卜素基因轉入玉米優(yōu)良自交系的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/9/7c7d9e3c-3aa1-4d06-9dfd-c0e5b5e3eb97/7c7d9e3c-3aa1-4d06-9dfd-c0e5b5e3eb971.gif)
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文檔簡介
1、類胡蘿卜素是人體內的重要的抗氧化物質,也是人體內的維生素A的前體,是人類必不可少的營養(yǎng)物質,但人自身不能合成,必須從食物中攝取,人體如果缺乏類胡蘿卜素,會引發(fā)很多疾病。玉米作為主要的糧食作為之一,類胡蘿卜素含量非常低。在發(fā)達國家,由于膳食均衡,人類健康沒有受到影響,但在我國西部地區(qū)和很多非洲國家,人們以玉米為主食,且他們飲食單一,類胡蘿卜素無法得到合理的補充,造成這些地區(qū)人群的維生素A缺乏癥(VAD),因此應用基因工程技術提高玉米中的類
2、胡蘿卜素含量具有非常重要的意義。本研究采用農桿菌侵染方法,將類胡蘿卜素合成基因轉入到高產優(yōu)質的玉米自交系中,我們選擇了玉米Ⅱ型愈傷和成熟胚作為外植體。
在以玉米Ⅱ型愈傷作外植體的遺傳轉化過程中,對其遺傳轉化體系進行了系統(tǒng)的優(yōu)化,以優(yōu)良玉米自交系天塔5母的幼胚為材料,誘導出Ⅱ型愈傷,用帶有質粒pCAMBIA2300-LmLycB-Bar根癌農桿菌C58侵染,對培養(yǎng)基和遺傳轉化因素進行優(yōu)化。共培養(yǎng)3天,延遲培養(yǎng)7天,再轉入含PPT
3、的培養(yǎng)基上連續(xù)篩選3代,分化獲得再生植株。經PCR和RT-PCR檢測確定獲得了2株陽性植株,HPLC檢測,轉基因玉米葉片總類胡蘿卜素含量為174.83μg/g,比未轉化的玉米提高了15.8%,轉基因玉米中β-胡蘿卜素的含量95.07μg/g,比未轉化的玉米顯著提高了60.2%。
本研究建立了新的玉米成熟胚的農桿菌遺傳轉化體系,確定了除草劑PPT的篩選濃度,在T0代中我們得到了20個玉米轉基因系,將它們種下去之后,有4個轉基因系
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