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![煙葉中葉綠素和類胡蘿卜素的測定_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-8/27/18/6e2716f0-b3c8-4223-a56d-f4d5f027bb6d/6e2716f0-b3c8-4223-a56d-f4d5f027bb6d1.gif)
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1、244730082存在特點(diǎn)和測定意義一、葉綠素種類:種類顏色丙酮溶液中長波吸收峰比例葉綠素a藍(lán)綠色663nm3葉綠素b黃綠色645nm1二、類胡蘿卜素種類:類胡蘿卜素包括:胡蘿卜素和葉黃素,二者之比是2:1。(胡蘿卜素的乙醚溶液在451處有吸收峰)三、測定意義:1、高水分,葉綠素含量高,愈近成熟,葉綠素降低。2、低生物堿品系,葉綠素含量高,不易烤高生物堿品系,葉綠素含量低,易烤3、葉綠素含量影響煙葉成熟落黃河烘烤特性葉綠素和類胡蘿卜素測
2、定葉綠素和類胡蘿卜素測定一、葉綠素測定1、原理:用有機(jī)溶劑將葉綠素提取出來,制成待測液,根據(jù)提取液對某一波長的光有選擇吸收,吸光度符合朗莫比爾定律,計(jì)算出待測液中葉綠素含量:E=lgI0I=KCL如果比色皿厚度一定,則上式簡化為:E=KCK:吸光系數(shù)C:濃度如果待測液中含有2種以上有色物質(zhì),其吸光度也符合朗莫比爾定律溶液中含有2種有色物質(zhì)時(shí),有下式成立:Eλ1=Ka1CaKb1Cb………(1)Eλ2=Ka2CaKb2Cb………(2)在葉
3、綠素的待測液中含葉綠素a和b,則有:E663=82.04Ca+9.27Cb………(1)E645=16.75Ca+45.6Cb………(2)244730082E663=82.04Ca+9.27Cb………(1)E645=16.75Ca+45.6Cb………(2)解聯(lián)立方程式(1)和(2)得到:Ca=0.0127E6630.00259E645Cb=0.0229E6450.00467E663Cab=0.00805E6630.0203E6452、測定
4、步驟①待測液制備:0.52g樣品于乳缽(研缽)內(nèi),加4倍體積的丙酮和約10mL80%的丙酮,乳棒研磨。用吸管仔細(xì)吸取抽出液轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶內(nèi),重向乳缽內(nèi)加入10mL80%的丙酮,繼續(xù)研磨,合并抽出液,如此反復(fù),直至研磨看不出有色素浸出為止,最后用80%丙酮定容到50mL,充分混勻,放冷暗處,使瓶內(nèi)溶液澄清。②測定:吸取2mL待測液,用80%丙酮稀釋到20mL,測定其在645nm,663nm處的吸光值E645,E663。3、計(jì)算:把測
5、定值代入下式計(jì)算得到葉綠素a和b的濃度,單位:gLCa=0.0127E6630.00259E645Cb=0.0229E6450.00467E663Cab=0.00805E6630.0203E645根據(jù)葉綠素濃度和待測液體積,分取倍數(shù),計(jì)算出葉綠素含量待測液體積:50mL,取2mL稀釋成20mL后測定吸光值。則有:二、類胡蘿卜素測定:1、原理:將葉綠素a和b分離出去,剩下的類胡蘿卜素溶于乙醚中,測定這個(gè)有色溶液在451nm處的吸光值,計(jì)算
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