雞樅菌絲體及其皂甙的深層發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、雞樅菌[Termitomyces albuminosus(Berkeley&Broome)Heim]是與白蟻共生的真菌,主要分布于非洲熱帶、亞洲熱帶、南太平洋島嶼和亞洲的亞熱帶地區(qū)。雞樅菌肉質(zhì)細嫩,氣味濃香,味道鮮美,營養(yǎng)豐富?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明,雞樅菌有增強人體免疫功能、預(yù)防腸癌、治療食欲不振,痔瘡等功效,因此很有必要對其雞樅發(fā)酵產(chǎn)品做詳細的研究。經(jīng)過植物化學(xué)分析表明,在此真菌中主要有多糖,皂甙,腦苷,香豆素,和麥角甾醇等物質(zhì)。

2、   皂甙是雞樅中的主要活性成分,是極具潛力的天然產(chǎn)物資源之一,受到人們廣泛的關(guān)注。皂甙是一類具有特殊生理功能的活性物質(zhì),具有降血脂、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗自由基、抑制腫瘤細胞生長,免疫調(diào)節(jié)等作用。本實驗研究發(fā)酵過程中雞樅皂甙的變化規(guī)律,并建立了簡便快速的測定方法,為雞樅的進一步開發(fā)和綜合利用提供理論依據(jù)和科學(xué)參考。工作的主要內(nèi)容包括:
   (1)對實驗室保存的雞樅菌株(JNPF-TA01),通過18S rDNA序列分析,

3、并結(jié)合ITS rDNA序列分析確定了其在分類學(xué)上的地位。該菌株與Termitomyces sp.的18S rDNA序列相似性最高,達到99%。ITS rDNA序列分析結(jié)果表明雞樅菌(JNPF-TA01)與Termitomyces sp.ZA164的ITS rDNA序列相似性達到96%,說明雞樅菌株(JNPF-TA01)是Termitomyces屬的一個種。
   (2)采用分光光度法測定雞樅發(fā)酵菌絲體中皂甙含量。以人參皂甙Rg1

4、為對照品,在吸收波長為550 nm下,標準濃度在10-240μg范圍內(nèi),濃度與吸光度呈良好的線性關(guān)系,回歸方程為:Y=0.0030X-0.0405,R2=0.9984。精密度變異系數(shù)(RSD)為1.89%,雞樅菌絲體皂甙類含量為2.69 mg/g菌絲體。本方法操作簡單快速,靈敏度高且比較準確,可用于測定雞樅發(fā)酵菌絲體皂甙的含量。
   (3)在搖瓶的水平上,分別考察了發(fā)酵培養(yǎng)基不同組分對雞樅生長的影響和胞內(nèi)皂甙產(chǎn)量的影響。通過對

5、發(fā)酵培養(yǎng)基碳氮源進行選擇及對各主要因素進行單因素實驗,得到優(yōu)化后的培養(yǎng)基組成為(g/L):蔗糖30,酵母粉3,磷酸二氫鉀2,硫酸鎂1.5;通過對培養(yǎng)條件的考察,發(fā)現(xiàn)優(yōu)化后接種量為10%,轉(zhuǎn)速為150 r/min,裝液量為120 mL,溫度為28℃,pH為4時,生物量由最初的12.1 g/L提高到15.4 g/L,胞內(nèi)皂甙產(chǎn)量由最初的28.4 mg/L提高到59.5 mg/L。與優(yōu)化前的培養(yǎng)基相比,生物量和產(chǎn)物產(chǎn)量均有較大提高,生物量是優(yōu)

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