Gas6通過PI3K-Akt-FoxO3a通路在預(yù)適應(yīng)中起心肌細胞保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：初步探討Gas6在預(yù)適應(yīng)中對大鼠心肌細胞缺氧|復(fù)氧損傷的保護作用及機制。
　　 方法：選擇心肌細胞株H9C2建立實驗?zāi)Ｐ?，實驗分?組：①正常對照組：正常培養(yǎng)H9C2細胞；②缺氧復(fù)氧組：缺氧2h，再復(fù)氧24h；③預(yù)適應(yīng)組：先缺氧20min，再復(fù)氧45min，隨后再缺氧2h，再復(fù)氧24h；④加外源性重組人生長停滯特異性蛋白6（rhGas6）組：加入終濃度為100ng/ml的rhGas6，余同缺氧復(fù)氧組；⑤Gas6+LY294

2、002組：加入終濃度為100ng/ml的rhGas6和終濃度為10umol/L的PI3K通路阻斷劑LY294002，余同缺氧復(fù)氧組。應(yīng)用流式細胞術(shù)測細胞凋亡率，測LDH活性了解心肌細胞受損程度；real time-PCR法測Gas6mRNA表達；免疫印跡法測（Western blot）測定磷酸化Akt、FoxO3a蛋白的表達。
　　 結(jié)果：預(yù)適應(yīng)組Gas6 mRNA表達高于缺氧復(fù)氧組（P＜0.05）；與缺氧復(fù)氧組對比，預(yù)適應(yīng)組和

3、Gas6組LDH的活性及細胞凋亡率明顯降低（P＜0.05），p-Akt和p-FoxO3a蛋白表達明顯增高（P＜0.05）；與Gas6組對比，Gas6+LY294002組LDH的活性及細胞凋亡率明顯增加，p-Akt和p-FoxO3a蛋白表達明顯減少（P＜0.05），而預(yù)適應(yīng)組LDH的活性及細胞凋亡率和p-Akt、p-FoxO3蛋白表達無明顯差異。
　　 結(jié)論：Gas6通過PI3K/Akt/FoxO3a 信號通路在預(yù)適應(yīng)中起心肌細胞

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