1、系統(tǒng)性高血壓(Systemic hypertension)是一種復(fù)雜的病理生理狀態(tài)，其主要原因是由機(jī)體長(zhǎng)期處于高血壓所導(dǎo)致，它是引發(fā)中風(fēng)、缺血性心臟病、外周血管性疾病和進(jìn)行性腎損害的主要危險(xiǎn)因素。腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system，RAS)活動(dòng)的亢進(jìn)在原發(fā)性高血壓的發(fā)展中起了關(guān)鍵性作用，有機(jī)構(gòu)估計(jì)，在促成各種類(lèi)型高血壓的因素中，RAS至少占了百分之十到百分之三十的比例。因此眾多研究已經(jīng)直接面向RAS及

2、其與控制血壓之間的關(guān)系。阻斷 RAS會(huì)降低血壓，減輕高血壓的病理生理影響，同時(shí)編碼RAS的一些基因同高血壓具有相關(guān)性。因此可以斷定RAs是調(diào)節(jié)正常血壓和原發(fā)性高血壓病理生理狀況的基本要素。 Genistein是一種異黃酮類(lèi)的植物雌激素，與17β-estradiol結(jié)構(gòu)相似。它是天然植物雌激素，可以選擇性與雌激素受體結(jié)合。Genistein可以預(yù)防心血管疾病因而近幾年來(lái)受到廣泛的關(guān)注。它可以降低膽固醇濃度，降低血壓，增加高密度膽固

3、醇，抑制血管平滑肌增殖，增加動(dòng)脈順應(yīng)性和抗氧化作用。因此，食用植物雌激素可能是通過(guò)這些作用來(lái)降低心血管疾病發(fā)病率。 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)是羧基末端二肽基肽鏈端解酶，在RAS中發(fā)揮了重要作用。ACE是存在于內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞膜的(胞)外酶，調(diào)控血管緊張度和滲透性，將血管緊張素Ⅰ(angiotensin Ⅰ，Ang Ⅰ)轉(zhuǎn)化成血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，Ang

4、 Ⅱ)并降解緩激肽(bradykinin，BK)。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiotensin-converting enzyme inhibitor，ACEI)已經(jīng)在治療大部分心血管疾病的臨床試驗(yàn)中取得成功。本研究探討了genistein對(duì)于大鼠ACE活性及ACE mRNA表達(dá)的影響，進(jìn)一步拓展對(duì)genistein血壓調(diào)節(jié)作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)。 本研究?jī)?nèi)容包括離體和在體兩部分實(shí)驗(yàn)，概述如下： 第一部分 Genistein對(duì)

5、Sprague-Dawley(SD)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(rat aortic endothelial cells，RAECs)ACE水平及ACE mRNA表達(dá)的影響 RAECs隨機(jī)分成以下幾組：(1)對(duì)照組；(2)genistein 10 μM，50 μM，100 μM and 200 μM四個(gè)不同濃度組；(3)17β-estradiol 100 μM；(4)captopril 1 mM；(5)tamoxifen 100 μM；

6、(6)genistein 100 μM+ta- moxifen 100 μM；(7)17β-estradiol 100 μM+tamoxifen 100 μM；(8)PD98059 10 μM和(9)genistein 100 μM+PD98059 10 μM。孵育48 h。在以上(6，7，9)組的細(xì)胞先給予tamoxifen或PD98059一小時(shí)后給予genistein或17β-estradiol處理。免疫熒光及逆轉(zhuǎn)錄酶-多聚酶鏈?zhǔn)椒?/p>

7、應(yīng)(reverse transcript polymerase chain reaction，RT-PCR)方法用于檢測(cè)ACE水平及ACE mRNA表達(dá)情況。 Genistein濃度依賴(lài)性的降低RAECs的ACE水平。Genistein對(duì)RAECs的ACE mRNA表達(dá)的影響與免疫熒光結(jié)果極為相似。此外，genistein對(duì)RAECs的ACE水平的影響被證明是通過(guò)雌激素受體(estrogen receptor)及細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激

8、酶1/2(extracellular sig- nal-regulated kinase 1/2，ERK1/2)通路來(lái)發(fā)揮作用的。 第二部分 Genistein對(duì)Sprague-Dawley(SD)大鼠ACE水平及 ACE mRNA表達(dá)的影響 大鼠被隨機(jī)分成以下幾組：(1)對(duì)照組；(2)genistein(2.5mg/kg/day，10 mg/kg/day，25 mg/kg/day，50 mg/kg/day)四個(gè)濃度組；

9、(3)17β-estradiol(0.5 mg/kg/day)；(4)captopril(8 mg/kg/day)；(5)tamoxifen(5 mg/kg/day)；(6)genistein(25 mg/kg/day)+tamoxifen(5 mg/kg/day)；(7)17β-estradiol(0.5 mg/kg/day)+tamoxifen(5 mg/kg/day)；(8)PD98059(4 mg/kg/day)；(9)geni

10、stein(25 mg/kg/day)+PD98059(4 mg/kg/day)；(10)17β-estradiol(0.5 mg/kg/day)+PD98059(4 mg/kg/day)。在以上相關(guān)組中先注射tamoxifen或PD98059十分鐘后注射genistein或17β-estradiol。藥物均采取尾靜脈注射方式，連續(xù)注射兩天，第二天給藥一小時(shí)后從大鼠胸主動(dòng)脈收集血樣測(cè)血清ACE水平。同時(shí)，取胸主動(dòng)脈測(cè)定組織ACE水平及組

11、織ACE mRNA表達(dá)情況。 注射不同濃度genistein可以劑量依賴(lài)性的降低血清ACE水平。在組織ACE水平及組織ACE mRNA表達(dá)情況與其類(lèi)似。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明，注射genistein對(duì)大鼠ACE的影響是通過(guò)雌激素受體及ERK1/2通路發(fā)揮作用的。 綜上所述，在體試驗(yàn)及離體試驗(yàn)均顯示，genistein可以劑量依賴(lài)性的降低ACE的水平，該影響是通過(guò)雌激素受體及激活ERK1/2通路發(fā)揮作用的。我們的研究結(jié)果拓展了對(duì)于