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文檔簡介
1、菠蘿是我國南亞熱帶地區(qū)最具特色和優(yōu)勢的熱帶水果之一,但是菠蘿育種研究還比較落后,面臨著大量種質資源的流失、鑒別與分類雜亂且欠準確、遺傳距離狹窄、品種退化等問題,難以適應菠蘿產業(yè)化發(fā)展的需要。如何利用現有的種質資源和合理選擇利用自然變異的優(yōu)良株系,或者通過人工雜交和誘變的方法來創(chuàng)造新的優(yōu)良品種勢在必行。本研究對菠蘿田間生物學特性進行簡單描述,利用SRAP分子標記技術及流式細胞儀對61份菠蘿種質資源進行種質鑒定、分類、親緣關系及菠蘿倍性鑒定
2、等方面研究,從形態(tài)學水平、分子水平以及細胞學水平上評價目前所收集保存的菠蘿資源的遺傳多樣性,為我國菠蘿的生產及育種提供理論依據。研究結果如下:[1]菠蘿屬于富含多糖、多酚的植物,且葉片革質化和含多種次生物質,這嚴重影響了DNA的抽提效率。本研究采用改良CTAB法提取到高質量的DNA,適合SRAF分析。 [2]建立了菠蘿SRAP的反應體系: 最佳的SRAP反應體系組分為:總反應體積為20μL,包括2.0μL10xPCRbu
3、ffer,1.2UTaqDNA聚合酶,20ng模板DNA,0.2mMdNTPs,0.3μM引物,2.5mMMg2+。 PCR擴增程序為:94℃預變性5min;94℃變性1min,35℃復性1min,72℃延伸1min,5個循環(huán);94℃變性1min,50℃復性1min,72℃延伸1min,35個循環(huán);72℃延伸6min,4℃保存。 [3]從99對SRAP引物中篩選出35對引物對61份菠蘿種質進行遺傳多樣性分析,都得到了清晰
4、的指紋,并且所有品種表現出多態(tài)性,說明了SRAP技術在菠蘿品種鑒定中的可行性。其中35對SRAP標記獲得567條帶,多態(tài)性位點384個,多態(tài)條帶比率為67.72%。 [4]利用SRAP標記得到的數據矩陣,采用Nei&Li的方法計算出各材料間的遺傳相似系數,應用UPGMA法獲得聚類圖。表明61份菠蘿種質間的親緣關系較近,說明所收集的種質遺傳基礎較窄。在類群的劃分上,依相似系數0.83的水平,可以將供試的61份菠蘿種質分為5種類型。
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