鼠IFN-λ2腺病毒載體建立及體外活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:克隆鼠IFN-λ2基因,構(gòu)建其腺病毒載體,獲取病毒重組子,并研究其生物學活性。
　　 方法:用人水皰口炎病毒VSV(vesicular stomatovirus)病毒誘導小鼠原代脾細胞表達IFN-λ2,通過RT-PCR獲取IFN-λ2 cDNA,將其亞克隆至pShuttle-CMV載體,經(jīng)Pme I線性化后,與腺病毒的骨架載體pAdEasy在BJ5183菌中同源重組,293A細胞包裝擴增,免疫熒光、Western blot

2、檢測mIFN-λ2蛋白的表達。mIFN-λ2對鼠肺腺癌細胞LA795的抑制作用,通過MTT細胞存活實驗檢測活性。
　　 結(jié)果:獲取鼠IFN-λ2的cDNA,序列與GeneBank公布序列完全一致,成功構(gòu)建腺病毒載體；MTT法研究Ad-mIFN-λ2和Ad-Lacz對小鼠肺腺癌細胞LA795的體外抑制作用,結(jié)果顯示mIFN-λ2對LA795細胞生長具有一定的抑制作用。
　　 結(jié)論:成功構(gòu)建mIFN-λ2的重組腺病毒載體,其

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