1、研究背景及目的：
　　原發(fā)性肝癌是嚴重危害人類健康的疾病之一,復發(fā)和轉移是肝癌患者預后差、死亡率高的主要原因。它的發(fā)生、發(fā)展是一個多階段的過程,涉及多個基因的改變。目前缺乏行之有效的早期診斷和防治措施。闡明其分子發(fā)病機制和致病基因,對于開發(fā)新的診療措施至關重要?，F(xiàn)有研究表明,在肝癌的發(fā)生、發(fā)展過程中存在著多種抑癌基因CpG島的異常甲基化現(xiàn)象,干擾抑癌基因的表達,導致細胞異常增殖,引起起細胞癌變。
　　本研究通過對不同肝癌細胞

2、株中TIMP-3mRNA的表達及其CpG島甲基化狀態(tài)的檢測,初步分析TIMP-3基因甲基化水平對mRNA表達的影響。并使用去甲基化藥物5-雜氮-2’脫氧胞苷對甲基化陽性的細胞株進行干預,觀察該藥物對肝癌細胞株中TIMP-3基因表達及其CpG島甲基化程度的影響。
　　方法：
　　運用熒光定量PCR檢測12例肝癌癌旁組織及8株肝癌細胞系中TIMP-3表達情況。使用MSP定性檢測8株肝癌細胞株、25例肝癌組織及23例癌旁組織中TI

3、MP-3CpG島甲基化狀況。使用去甲基化藥物5-雜氮-2’脫氧胞苷對甲基化陽性的細胞株進行干預,觀察干預組與對照組TIMP-3基因表達差異,并使用焦磷酸測序技術定量檢測CpG島甲基化差異。
　　結果：
　　研究發(fā)現(xiàn)8株肝癌細胞中TIMP-3mRNA表達均顯著低于肝癌旁組織(P<0.01)。而且在8株肝癌細胞系中有C3A、Hep-3B、HepG23株檢測到TIMP-3CpG島甲
　　基化陽性,經(jīng)去甲基化藥物干預后,經(jīng)去甲

4、基化藥物干預后,在這3株肝癌細胞中均發(fā)現(xiàn)TIMP-3mRNA的表達較對照組有明顯上調(P<0.05),CpG島的甲基化率下降(P<0.05)。在25例肝癌組織中有9例出現(xiàn)了甲基化(36％),23例癌旁組織中有5例出現(xiàn)了甲基化(21.7%),兩者比較無統(tǒng)計學差異(P=0.349)。
　　結論：
　　TIMP-3啟動子區(qū)域CpG島甲基化是其在肝癌細胞株中表達降低的原因之一,而且甲基轉移酶抑制劑能顯著降低肝癌細胞株TIMP-3Cp