1、目的：建立穩(wěn)定表達小鼠白細胞介素21(mlL-21)的瘤苗，觀察其在小鼠體內(nèi)是否能夠誘導有效的抗腫瘤免疫反應及免疫記憶效應，并探討IL-21瘤苗抗腫瘤的可能作用機制。 方法：將已鑒定的重組質(zhì)粒pcDNA3．1/mlL-21用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染SP2/0細胞制備瘤苗，用G-418壓力篩選， RT-PCR法鑒定瘤苗中mIL-21的轉(zhuǎn)錄表達。體外流式細胞儀檢測瘤苗細胞表面MHC-Ⅰ類分子、CD80分子的表達，通過細胞周期反映瘤苗體外增殖活

2、性。瘤苗細胞接種Balb/c小鼠，通過監(jiān)測腫瘤生長情況，觀察mlL-21瘤苗誘導的抗腫瘤效應。以CFSE，7-AAD標記，流式細胞儀檢測NK、CTL等免疫細胞活性、RT-PCR法檢測腫瘤組織CXC家族趨化因子I-TAC的表達、ELISA法檢測血清IFN-γ和IL-4含量、SP2/0瘤細胞二次攻擊未長腫瘤實驗小鼠等方法探討瘤苗SP2/0-mlL-21可能的作用機制。 結果：得到穩(wěn)定表達mlL-21的瘤苗SP2/0-mIL-21，其

3、表面MHC-Ⅰ類分子表達明顯上調(diào)。與對照組相比，體外增殖活性無差異。皮下接種瘤苗SP2/0．mIL-21到Balb/c小鼠后，腫瘤生長緩慢，部分小鼠腫瘤消失或無瘤生長、長期存活，給予野生株SP2/0瘤細胞再次攻擊腫瘤消失或無瘤實驗小鼠，4周后75﹪仍未見腫瘤生長；實驗小鼠NK、CTL細胞毒活性有意義增強；腫瘤組織內(nèi)檢測到I-FAC的表達；血清IFN-γ水平明顯上升，IL-4無明顯增高。 結論：成功構建mIL-21瘤苗，接種Bal