含對蝦白斑綜合癥病毒ie1啟動子的重組桿狀病毒介導的哺乳動物細胞基因轉(zhuǎn)移.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、隨著攜帶哺乳動物細胞啟動子的重組桿狀病毒逐漸成為基因功能研究、非復制型載體疫苗研制以及開發(fā)基因治療策略的一個非常有效的工具，尋找一種在昆蟲細胞和哺乳動物細胞之間的穿梭啟動子對于桿狀病毒介導的基因轉(zhuǎn)移方面的研究非常必要。 在本研究中，我們利用對蝦白斑綜合癥病毒 (white spot syndrome virus，WSSV) 的iel啟動子和桿狀病毒ETL啟動子以及桿狀病毒多角體啟動子，分別構(gòu)建了含有不同啟動子調(diào)控下的EGFP報告

2、基因表達盒的重組桿狀病毒，然后轉(zhuǎn)導不同哺乳動物細胞，以檢測不同啟動子在細胞中的轉(zhuǎn)導和表達效率。結(jié)果顯示，WSSV的iel啟動子在昆蟲細胞sf9中具有很強的啟動子活性，能夠控制報告基因的高效表達，同時在哺乳動物細胞中，iel 啟動子與 ETL 啟動子一樣在不同哺乳動物細胞中均有活性，能夠介導EGFP不同水平的表達，并且丁酸鈉能夠提高iel啟動子在哺乳動物細胞中的轉(zhuǎn)導和表達效率。轉(zhuǎn)移載體瞬時轉(zhuǎn)染結(jié)果證實，iel啟動子能夠直接啟動外源基因在哺

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