1、背景：在缺血性心臟病的治療中,心肌再生一直是國內外研究的焦點。骨髓間充干細胞(BMSCs)易于獲取,在一定條件下,能在體外大量擴增,同時自體移植不存在倫理爭議,也沒有免疫排斥反應且在體內外不同誘導條件下可分化為內皮細胞、成骨細胞、心肌細胞等優(yōu)勢[1-4],備受關注。研究發(fā)現,BMSCs在體內、體外誘導環(huán)境下,均可分化為心肌樣細胞,但其機制尚不明確[5-7]。本實驗將大鼠BMSCs分別用5-氮胞苷(5-Aza)誘導和與心肌細胞(CM)共培

2、養(yǎng)的方法進行體外誘導,觀察大鼠BMSCs誘導分化后的生長情況和形態(tài)變化,及其在不同時間段分化為心肌樣細胞的能力及表達心肌樣細胞特異性標記物cTnI、Cx43和心肌特異性轉錄因子GATA-4的差別,為今后進一步研究BMSCs分化機制以及應用于臨床治療缺血性心臟病提供一定的理論依據和技術手段。
　　目的：研究體外不同誘導條件下大鼠BMSCs在不同時間段分化為心肌樣細胞的能力及表達心肌樣細胞特異性標記物的差別。
　　方法：分離培養(yǎng)

3、SD大鼠BMSCs和SD乳鼠CM并鑒定。取第3代BMSCs分別進行5-氮胞苷(5-Aza)誘導、與CM共培養(yǎng)及單獨培養(yǎng)。分別于第2、4、6、8、10周使用倒置顯微鏡觀察細胞生長情況和形態(tài)變化,RT-PCR檢測每組心肌特異性基因cTnI、Cx43和心肌特異性轉錄因子GATA-4。
　　結果：單獨培養(yǎng)組未見有搏動細胞,cTnI、Cx43和GATA-4基因表達陰性;5-aza誘導組于第2周時細胞呈梭形且排列方向趨于一致,未見有搏動細胞,

4、cTnI、Cx43基因表達第8周達到高峰,GATA-4基因表達第4周達高峰;共培養(yǎng)組細胞多為梭形,成肌性排列,可見搏動頻率不一致的搏動細胞,cTnI、Cx43基因表達于第2-8周表達逐漸增加,GATA-4基因表達第6周達高峰;相同時段內,共培養(yǎng)組的GATA-4、cTnI、Cx43基因表達高于5-Aza誘導組(P<0.05)。隨著培養(yǎng)時間的延長三組細胞崩解死亡的細胞數開始增多,培養(yǎng)12周后尤其明顯。
　　結論：BMSCs經5-Aza