1、本文從中醫(yī)經典古籍入手，對歷代醫(yī)書及當代醫(yī)家有關肝癌的文獻進行了整理研究，從病名沿革、病因病機等方面梳理其學術發(fā)展脈絡，并重點闡述了柴胡注射液與肝癌治療之間的關系，提出了柴胡注射液能抑制人肝癌細胞的增殖及促進其凋亡的觀點。 目的： 本實驗采用柴胡注射液作用于體外培養(yǎng)的人肝癌細胞株HepG2，抑制其增殖，誘導細胞凋亡，并從分子水平探討其發(fā)生的可能機制。 方法： 1、柴胡注射液抑制人肝癌細胞株HepG2增殖的

2、實驗研究。 1.1空白對照組(含10％小牛血清的1640培養(yǎng)液)和氟尿嘧啶陽性對照組(血峰濃度10μg/L)，及柴胡注射液3mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml、50mg/ml不同濃度實驗組。 1.2噻唑藍比色法(MTT)檢驗人肝癌細胞株HepG2對柴胡注射液的藥物及對氟尿嘧啶注射液敏感性。 1.3應用流式細胞術(FCM)檢測人肝癌細胞株HepG2周期的改變。 2、柴胡注射液誘導Hep

3、G2細胞凋亡研究。 2.1應用倒置顯微鏡、熒光顯微鏡觀察細胞凋亡形態(tài)的改變。 2.2應用流式細胞儀檢測細胞凋亡率。 2.3一步法TUNEL檢測細胞凋亡率。 結果： 1、柴胡注射液對HepG2的生長有明顯的抑制作用，并誘導細胞發(fā)生凋亡，MTT檢測表明柴胡注射液對人肝癌細胞的增殖有劑量——效應關系，隨濃度的升高，抑制率增高，其半數抑制濃度為(IC50)約為50mg/ml。 柴胡注射液微劑量(3

4、mg/ml)與空白對照組之間無顯著性差異，柴胡注射液25mg/ml組與陽性對照組氟尿嘧啶組之間無顯著性差異，其他各組之間進行兩兩比較，均有顯著性差異。 根據流式細胞儀檢測結果提示，當濃度為5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml柴胡注射液作用人肝癌細胞株HepG2 12小時后，G1期的細胞的百分比不斷減少，柴胡注射液為5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml時，G1％分別為66.30％，57.27％，49.23％?？梢姴?/p>

5、胡注射液對人肝癌細胞株HepG2的阻滯主要在G1期。 2、柴胡注射液對體外肝癌細胞株HepG2凋亡的影響 2.1加入柴胡注射液12h后，與空白對照組相比，HepG2細胞形態(tài)發(fā)生顯著變化，倒置顯微鏡下觀察發(fā)現細胞體積縮小，變圓，胞漿量減少，并隨著藥物濃度增加，貼壁細胞逐漸減少，懸浮細胞增多；而當柴胡注射液實驗組濃度達到25mg/ml時，其作用效果與氟尿嘧啶陽性對照組幾乎相同。 2.2經柴胡注射液作用后的HepG2細