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![丙泊酚對大鼠缺血再灌注小腸細胞凋亡及相關(guān)基因表達的影響.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/9b96fd3b-c45a-4302-9796-bac88eb05a66/9b96fd3b-c45a-4302-9796-bac88eb05a661.gif)
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文檔簡介
1、目的:研究丙泊酚對大鼠缺血再灌注小腸細胞凋亡及相關(guān)基因Bcl-2、Bax蛋白表達的影響,探討其可能的機制。 方法:健康SD大鼠24只隨機分為三組,假手術(shù)組(S組)、缺血再灌注+生理鹽水組(I/R+NS組)、缺血再灌注+丙泊酚組(I/R+P組),每組8只。各組均用10﹪水合氯醛(3ml·kg<'-1>)行腹腔注射麻醉,夾閉腸系膜上動脈制備小腸缺血再灌注模型。I/R+NS組和I/R+P組用無創(chuàng)微血管夾夾閉腸系膜上動脈1小時,再灌注2
2、小時。S組和I/R+NS組于術(shù)前10分鐘開始分別靜脈泵注生理鹽水10ml·kg<'-1>h<'-1>。(I/R+P)組于夾閉腸系膜上動脈前10分鐘靜脈泵注丙泊酚10 mg·kg<'-1>·h<'-1>。手術(shù)和缺血再灌注過程中均面罩給氧(FiO<,2>=33﹪),術(shù)畢斷頭處死動物。每只大鼠取距回盲部10cm空腸組織3cm,生理鹽水沖凈腸內(nèi)容物,10﹪甲醛溶液固定,常規(guī)制備全層石蠟組織切片,分別做病理分析,Bcl-2、Bax蛋白的表達及細胞
3、凋亡的檢測。每組選16個視野分別測量光密度值(OD值)。TUNEL法檢測凋亡的小腸細胞并計算凋亡指數(shù)。 結(jié)果: 1、HE光鏡觀察組織損傷:S組絨毛排列整齊,血管周圍結(jié)構(gòu)正常,無明顯出血,肌層和漿膜層組織結(jié)構(gòu)正常;I/R+NS組組織出現(xiàn)顯著水腫,毛細血管淤血,絨毛上皮細胞脫落,腺體嚴重受損,尤其以絨毛頂端最為嚴重,肌層斷裂,有炎性細胞的浸潤;I/R+P組部分絨毛輕微水腫,頂端上皮輕微受損,壞死為局限性。 2、Bcl
4、-2和Bax蛋白表達的結(jié)果:Bcl-2陽性表達為胞漿染色呈棕黃色,部分亦可在胞核見到陽性染色。Bax蛋白的陽性表達為胞漿染色呈黃褐色。 Bcl-2的OD值在I/R+NS組比S組升高(0.092±0.017比0.057±0.022,P<0.05)而I/R+P組的OD值比I/R+NS組顯著升高(0.242±0.062比0.092±0.017,P<0.01);Bax蛋白的OD值在I/R+NS組高于S組(0.303±0.087比0.10
5、1±0.035,P<0.01)、I/R+P組的OD值比I/R+NS組低(0.167±0.061比0.303±0.087,P<0.01))但比S組高(0.167±0.061比0.101±0.035,P<0.05)。 3、TUNEL染色:TUNEL標記陽性染色為棕黃色,主要位于細胞核。凋亡檢測結(jié)果表明I/R+NS組細胞凋亡指數(shù)明顯高于S組(0.449±0.019比0.138±0.049,P<0.01),I/R+P組凋亡指數(shù)明顯低于I
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