壓應力通過調(diào)節(jié)SREBP-1-小凹蛋白-1信號通路促進ox-LDL誘導的平滑肌細胞膽固醇蓄積.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察壓應力對平滑肌細胞膽固醇蓄積的影響及其與SREBP-1/Caveolin-1信號通路的關系。 方法:首先以血管平滑肌細胞(A10)為研究對象,不同壓應力(0,60, 90,120,150,180mmHg)作用下,以50mg/Lox-LDL作用于平滑肌細胞48小時,油紅O初步檢測細胞荷脂情況,高效液相色譜分析法檢測細胞內(nèi)游離膽固醇,總膽固醇含量;并計算膽固醇酯/總膽固醇的值,RT-PCR檢測caveolin-1,SREB

2、P-1,ApoE的mRNA的表達情況Western 印跡法檢測caveolin-1,SREBP-1,SR-B1蛋白的表達情況, 結果:在不同壓應力(0,60,90,120,150,180mmHg)作用的條件下,ox-LDL誘導血管平滑肌細胞48小時,油紅O染色,觀察到細胞仍為長梭形,但是隨著壓力的增加,細胞胞漿體積擴大,脂滴明顯增多。細胞內(nèi)游離膽固醇的含量分別為60.5±2.8,71.2±3.4,90.1±9.1,110.5±2

3、2.1,133.5±11.1,150.8±9.4mg/g,總膽固醇的含量分別為92.3±2.1,122.8±12.3,163.8±9.9,245.6±7.8,317.9±5,386.7±6.4mg/g,膽固醇酯/總膽固醇的比值分別為30℅,42﹪,45﹪,55﹪,58﹪.61﹪. RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)壓應力使caveolin-1,SREBP-1,ApoE mRNA的表達明顯下調(diào)。 Western blotting檢測caveolin-1

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