1、背景：骨折是一種常見多發(fā)病。隨著現(xiàn)代工業(yè)與交通發(fā)展所致的高能量損傷、人口老齡化等一系列因素的影響，骨折不愈合或延遲愈合的發(fā)生率日益增高。因此，尋求一種有效的治療方法一直是骨科界的重要研究課題之一。體外沖擊波是近二十多年來發(fā)展起來的一門新技術(shù)，它具有非侵襲性、并發(fā)癥少等優(yōu)點(diǎn)，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)生物領(lǐng)域。體外沖擊波最先應(yīng)用于治療泌尿系統(tǒng)結(jié)石，后來研究發(fā)現(xiàn)沖擊波可激活成骨細(xì)胞活性，具有潛在成骨作用，進(jìn)而促進(jìn)骨折的愈合，因而更加廣泛地用于骨

2、與軟組織系統(tǒng)疾病的治療。文獻(xiàn)報(bào)道體外沖擊波治療骨折不愈合或延遲愈合的成功率為62％~83％，其取得了良好臨床療效，是治療骨折不愈合或延遲愈合的一種有效方法。然而沖擊波促進(jìn)骨折愈合的具體機(jī)制目前尚不清楚，雖然很多學(xué)者對(duì)此進(jìn)行了深入研究，但關(guān)于沖擊波對(duì)成骨細(xì)胞粘附及遷移影響的研究尚未見報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)即對(duì)上述問題進(jìn)行探討。
　　 目的：通過應(yīng)用沖擊波作用于體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞，確定沖擊波作用的適宜能量值，觀察沖擊波對(duì)成骨細(xì)胞的增殖、分

3、化、粘附及遷移等的影響，通過檢測(cè)介導(dǎo)細(xì)胞粘附的重要分子——整合素的表達(dá)，分析與其相關(guān)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，揭示沖擊波未被發(fā)現(xiàn)的作用機(jī)制。
　　 方法：將原代培養(yǎng)的成骨細(xì)胞隨機(jī)分成沖擊波組（SW組）和對(duì)照組，應(yīng)用不同能量的沖擊波進(jìn)行處理后接種于96孔培養(yǎng)板，根據(jù)細(xì)胞存活率和細(xì)胞增殖情況確定適宜的沖擊波能量值。采用CCK-8法細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞分泌堿性磷酸酶測(cè)定、茜素紅染色、細(xì)胞粘附率測(cè)定、傷痕愈合試驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)整合素β1的表達(dá)

4、及RT-PCR檢測(cè)整合素β1 Mrna的表達(dá)等方法，對(duì)SW組和對(duì)照組的細(xì)胞增殖、分化、粘附及遷移進(jìn)行測(cè)定。
　　 結(jié)果：沖擊波處理體外原代培養(yǎng)成骨細(xì)胞的適宜能量為10kV（500），CCK-8法檢測(cè)顯示SW組細(xì)胞增殖速度快于對(duì)照組（P<0.001）；SW組細(xì)胞分泌堿性磷酸酶高于對(duì)照組（P<0.001），茜素紅染色分析顯示SW組礦化結(jié)節(jié)面積明顯大于對(duì)照組（P<0.001），說明SW組細(xì)胞的分化程度明顯高于對(duì)照組細(xì)胞；細(xì)胞粘附率測(cè)定

5、顯示SW組細(xì)胞明顯高于對(duì)照組（P<0.01），整合素β1及其Mrna的表達(dá)均高于對(duì)照組（P<0.001），說明細(xì)胞的粘附能力明顯強(qiáng)于對(duì)照組；SW組細(xì)胞遷移的平均距離大于對(duì)照組（P<0.05），說明SW組細(xì)胞的遷移能力明顯強(qiáng)于對(duì)照組。
　　 結(jié)論：采用植塊法培養(yǎng)的成骨細(xì)胞，經(jīng)過反復(fù)貼壁法進(jìn)行純化，可以得到純度較高的成骨細(xì)胞，并且較好地保持了細(xì)胞膜的生物特性，適用于細(xì)胞學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)研究。適宜能量沖擊波可促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、分化、粘附