1、目的:本研究旨在觀察17β-雌二醇（E2）對MCF-7乳腺癌細(xì)胞抗失巢凋亡能力的影響及鈣激活蛋白酶（CANP）-局部黏著斑激酶(FAK)通路在其中的介導(dǎo)作用,探討雌激素促進(jìn)乳腺癌惡性進(jìn)展的信號機制，為探尋乳腺癌的高效治療方法提供實驗依據(jù)。
　　實驗方法：以雌激素受體(ER)陽性 MCF-7乳腺癌細(xì)胞為研究模型(激素敏感性細(xì)胞MCF-10A,及激素非敏感性MDA-MB-231作為對照)，聚甲基丙烯酸羥乙基酯（poly-Hema）涂層

2、培養(yǎng)細(xì)胞誘導(dǎo)失巢凋亡，E2刺激及 MEK和FAK抑制劑預(yù)處理細(xì)胞，通過蛋白印跡法觀察蛋白表達(dá)變化及ERK和FAK磷酸化情況，MTT法及臺盼藍(lán)染色/細(xì)胞計數(shù)法檢測細(xì)胞存活力，Hoechst熒光染色法檢測細(xì)胞凋亡。
　　實驗結(jié)果：
　　1) E2增強MCF-7細(xì)胞抗失巢凋亡能力及ERK/FAK磷酸化。與細(xì)胞貼壁培養(yǎng)比較，poly-Hema懸浮培養(yǎng)可明顯降低MCF-7細(xì)胞的存活率；以E2處理懸浮培養(yǎng)細(xì)胞24 h，發(fā)現(xiàn)E2可明顯提高

3、細(xì)胞存活率及減少細(xì)胞凋亡；E2還能提高細(xì)胞在細(xì)胞致死劑嘌呤霉素作用下的細(xì)胞存活力。此外，E2處理可增強模型細(xì)胞 ERK和FAK的磷酸化。
　　2) U0126及Calpeptin抑制E2誘導(dǎo)的ERK/FAK磷酸化及抗失巢凋亡效應(yīng)。以E2處理模型MCF-7細(xì)胞12 h，發(fā)現(xiàn)以MEK抑制劑U0126預(yù)處理細(xì)胞，則E2誘導(dǎo)的ERK和FAK磷酸化均受到顯著抑制，同時 E2的抗失巢凋亡作用也明顯減弱；采用CANP抑制劑預(yù)處理模型細(xì)胞可明顯抑

4、制ERK磷酸化及E2的抗失巢凋亡效應(yīng)。
　　3)乳腺腫瘤細(xì)胞CANP活性明顯高于正常乳腺上皮細(xì)胞。MCF-7細(xì)胞在E2或表皮生長因子（EGF）的作用下，其胞內(nèi)CANP易于被激活，并可被CANP抑制劑阻斷；在MBDA-MB-231，CANP對EGF刺激也很敏感。相反，MCF-10A細(xì)胞內(nèi)CANP對E2或EGF刺激均不敏感。
　　4) FAK抑制劑抑制E2誘導(dǎo)的ERK磷酸化及抗失巢凋亡效應(yīng)。采用FAK抑制劑（FI）預(yù)處理模型細(xì)胞