白術(shù)活性多糖的分離純化及組成研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本課題以湖南平江產(chǎn)地白術(shù)干燥根莖為原料,對(duì)白術(shù)活性成分-多糖進(jìn)行提取、分離、純化、分子量的測(cè)定及組成研究。
   通過(guò)方法學(xué)比較,首次確定白術(shù)活性多糖含量測(cè)定的最佳方法,試驗(yàn)表明采用苯酚-硫酸法測(cè)定白術(shù)多糖含量,操作簡(jiǎn)便,穩(wěn)定可靠,適于基層單位使用,在此條件下測(cè)得白術(shù)水提浸膏中粗多糖(CAMP)含量為41.77%。通過(guò)對(duì)醇沉濃度、脫蛋白、脫色效果進(jìn)行考察,優(yōu)化白術(shù)多糖分離純化方案。結(jié)果表明:采用85%乙醇沉淀,三氯乙酸(TCA)

2、脫蛋白,活性炭脫色:溫度60℃,時(shí)間15 min,活性炭加入量為1%,pH為4.5,純化效果最佳,得白術(shù)精多糖(RAMP)。RAMP采用DEAE-52柱層析得RAMP-1、RAMP-2、RAMP-3,RAMP-1繼以Sephadex G-100柱層析,得一單峰。本課題首次采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法(HPLC-ELSD)檢測(cè)白術(shù)多糖的重均分子量。采用T5、T10、T20、T40、T70不同分子量的標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖系列,以保留時(shí)間為橫坐

3、標(biāo),重均分子量的對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣品多糖的重均分子量(Mw)。試驗(yàn)結(jié)果表明Mw在5000~70000范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,所得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為:lgMw=-0.303tR+3.4816,r=-0.9900,測(cè)得樣品多糖重均分子量為32767。采用該法操作簡(jiǎn)便,方法重現(xiàn)性較好,準(zhǔn)確性較高。
   本課題對(duì)RAMP的組成進(jìn)行研究,通過(guò)紅外光譜(IR)、紙色譜(PC)、氣相色譜(GC)分析、氣-質(zhì)聯(lián)用色譜(GC-MS)

4、、氣相-聲表面波傳感器(FGC/SAW)確定白術(shù)精多糖RAMP的結(jié)構(gòu)及其組成。IR顯示RAMP具有典型的多糖吸收峰,GC、GC-MS及FGC/SAW檢測(cè)得RAMP單糖組成為阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖,其摩爾比為1∶0.74:1.88∶1.07。FGC/SAW作為一種新型氣相色譜,用于多糖組成的研究,其快速的檢測(cè)速度預(yù)計(jì)在藥物分析領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
   白術(shù)作為一種藥食同源的植物,近年來(lái),其活性成分多糖的增強(qiáng)免疫功能

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