禽呼腸孤病毒σC、σB基因的克隆及表達.pdf_第1頁
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1、V774867分類號密級單位代碼：10019學號：502310’專目巖t夭等。碩士學位論文禽呼腸孤病毒oc、oB基因的克隆及表達CloningofOC、0BGeneofAvianReovirusandTheirProkaryoticExpression研究生：指導教師：合作指導教師：申請學位門類級別：專業(yè)名稱：研究方向：所在學院：韭劍絲里直苤硒塞雖睦酉圭4直縫盞醫(yī)啞盔堂亟主亟陵蓋醫(yī)堂麴塑瘞遁途逝生隨迨動物醫(yī)堂醫(yī)2005年6月Abstra

2、ctAvianreovirus(ARV)isaninzportantcauseofdiseaseinpoultryInparticolarreovimsinducedarthritischronicrespiratorydiseases，andmalabsorptionsyndromecauseconsiderableeconomiclossesThe0CencodedbytheARVS1geneisepitopedof326amino

3、acidsandpossessesbothbroadlyspecificepitopesTheoBencodedbytheARVS3geneisepitopedof368antinoacidsandcarriesgroupspecificneutralizingepitopesBothproteinsarealsoinvolvedintheinductionofcellfusionandmayplayallimportantrolein

4、viralpathogenesis，TheyallpossessgroupspecificneutralizingepitopeswhichhaverelationshipwithemergingofneutralizingantibodyTheoCandoBgeueofARVweresuccessfullyamplifiedbyReverseTranscriptionPolymeraseChainReactioninonestepus

5、ingdesignedprimersandwereclonedandsequencedTheirsequencesofcDNAandallllnoacidswereanalyzedwithcomputersoftwareonmolecularbiologyBssedontheresultsofrestrictionenzymemapanalysis，expressionprimersweredesigened，Cloned0Cand0B

6、geuewereinsertedintothebacterialplasmidspGEX4T1Therecombinantplasmidscontaining0CoroBwereidentifiedbyrestrictionenzymeanalysisandPCRmethodsTherecombinantfusionproteinwashighlyexpressedintheformofinclusionbodiesinEcoliBL2

7、1inducedby1PTGMolecularweightoffusionprotein0Cisabout60KDaandfusionprotein0Bis64KDatheyarcidenticalwiththatofexpectedWesternblotanalysiswi山ARV—positiveserumshowedthefusionproteinshadgoodspecificityThepurifed0CandoBprotei

8、nwmidentifiedusingELISAmethodTheresultsshowthatthesepurifedproteinshavegoodactivityinthisstudythepurifiedproteinoCandoBalsoⅢhetestedfortheirimmunogenicfeatureandtheirfunctioninthepathogenesisKeywords：AvianreovirusoCprote

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