1、母豬產(chǎn)仔數(shù)的高低是衡量豬繁殖性狀的重要指標(biāo)，也是決定企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益的關(guān)鍵因素，但由于豬本身的制約性，使得遺傳改良進(jìn)展緩慢。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育新品種已成為如今育種工作的主要途徑，而動(dòng)物種質(zhì)資源的創(chuàng)新也進(jìn)入到了一個(gè)全新的發(fā)展時(shí)期。研究表明，HOXA11基因在子宮內(nèi)膜形態(tài)的構(gòu)建、子宮周期性形態(tài)的變化、子宮容受性的建立、胚胎的著床及附植等方面發(fā)揮著重要的作用，且HOXA11基因受雌激素、孕激素等多種因素的調(diào)控。本實(shí)驗(yàn)選取與

2、豬繁殖性狀密切相關(guān)的HOXA11基因作為研究對(duì)象，對(duì)其轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制進(jìn)行初步分析研究，主要獲得以下結(jié)果：
　　 (1)利用比較基因組學(xué)和RT-PCR的方法，克隆了豬HOXA11基因的cDNA序列，得到該基因的CDS全長(zhǎng)，共951bp。同時(shí)分析了該基因的結(jié)構(gòu)，豬HOXA11基因含有兩個(gè)外顯子，72bp的5'UTR和1576bp的3'UTR。
　　 (2)利用RT-PCR的方法，檢測(cè)了豬HOXA11基因在成年梅山豬的心臟、肝臟

3、、脾臟、肺臟、腎臟、胃、小腸、肌肉、淋巴和子宮內(nèi)膜10個(gè)組織中的，結(jié)果顯示豬HOXA11基因在子宮內(nèi)膜特異表達(dá)，在其他幾個(gè)組織中幾乎不表達(dá)。
　　 (3)在大白和梅山這兩個(gè)品種的四個(gè)不同時(shí)期(發(fā)情15天、妊娠15天、妊娠26天、妊娠50天)對(duì)HOXA11基因的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示在大白豬中，妊娠15天時(shí)該基因的表達(dá)量要高于其他時(shí)間點(diǎn)，在妊娠50天時(shí)，表達(dá)量最低；而在梅山豬中，從發(fā)情15天一直到妊娠26天，HOXA11基因

4、持續(xù)高表達(dá)，但在妊娠50天時(shí)，該基因的表達(dá)量也同樣降低。
　　 (4)通過(guò)生物信息學(xué)的方法，克隆了豬HOXA11基因的啟動(dòng)子序列，并構(gòu)建了5’端缺失啟動(dòng)子載體，分析雙熒光素酶活性檢測(cè)結(jié)果顯示，豬HOXA11基因2kb啟動(dòng)子載體具有較高的啟動(dòng)活性，是pGL3-Basic空載體活性的5倍；對(duì)該基因的啟動(dòng)子序列進(jìn)行預(yù)測(cè)分析后發(fā)現(xiàn)，該啟動(dòng)子可能與轉(zhuǎn)錄因子AP-1、c-JUN、OCT-1、GATA-3有較高的結(jié)合活性；將該啟動(dòng)子載體分別轉(zhuǎn)

5、染PK15、C2C12和Ishikawa細(xì)胞系，分析結(jié)果后發(fā)現(xiàn)該啟動(dòng)子并非子宮內(nèi)膜特異表達(dá)，在其他兩種細(xì)胞系中也有表達(dá)，但活性低于子宮內(nèi)膜的活性。
　　 (5)孕酮體外注射懷孕小鼠，分別采用2mg和4mg的劑量，以未處理的正常懷孕小鼠作為陰性對(duì)照，分別在懷孕4天、5天和6天采集小鼠子宮內(nèi)膜樣品，分析HOXa11基因的表達(dá)情況，結(jié)果顯示體外孕酮刺激可提高小鼠子宮內(nèi)膜HOXa11基因的表達(dá)，且2mg的效果要好于4mg，但在懷孕6天，