芳樟葉黃酮和多糖的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定及抗氧化活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、我國是世界上生產(chǎn)芳樟油最多的國家,其產(chǎn)量占世界的80%。樟樹是我國生產(chǎn)天然香料芳香油的主要樹種,經(jīng)濟(jì)價(jià)值高。近年來,通過組培、扦插等方法培育出純種芳樟,大大提高樟樹資源的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。但在提取精油過程中產(chǎn)生數(shù)量巨大的芳樟枝葉等廢棄物,由于對(duì)芳樟廢棄物的資源化研究力度不夠,忽視了許多有藥用價(jià)值的化學(xué)成分如黃酮、多糖等化合物的開發(fā)利用,造成芳樟資源浪費(fèi)嚴(yán)重,有必要改進(jìn)和發(fā)展芳樟中有效成分的提取純化工藝以及尋找其中有生物活性的化學(xué)成分,為芳樟資源

2、的綜合利用提供理論與實(shí)踐依據(jù),發(fā)揮其最好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。 通過對(duì)芳樟樹不同部位的測(cè)定發(fā)現(xiàn),不同部位中總黃酮含量和FRAP值均有明顯差異,其中芳樟葉的總黃酮含量和FRAP值最高。不同部位中總黃酮含量與FRAP值呈正相關(guān)性。高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定結(jié)果表明芳樟葉中黃酮苷元主要含有槲皮素、山奈素和異鼠李素,其含量分別為:0.39%、0.14%和0.063%,在芳樟葉中大部分以黃酮糖苷的形式存在。 通過單因素實(shí)驗(yàn)和正

3、交試驗(yàn)優(yōu)化了芳樟葉黃酮的微波輔助萃取工藝條件:乙醇濃度60%(v/v),料液比1:12(g/mL),微波功率320 W,間歇輻射兩次,每次1 min,芳樟葉黃酮提取得率達(dá)2.97%,比乙醇熱回流提取提高了6.83%,并且提取時(shí)間縮短了近99%;為了進(jìn)一步純化芳樟葉黃酮,通過測(cè)定10種大孔樹脂對(duì)芳樟葉黃酮的靜態(tài)吸附量和解吸率,確定了芳樟葉黃酮純化工藝的吸附劑DA201樹脂,并優(yōu)化了DA201樹脂對(duì)芳樟葉黃酮的動(dòng)態(tài)吸附和解吸工藝條件:上柱液

4、黃酮濃度為13.20 mg/mL,樹脂柱徑高比為1:10,吸附流速為3 BV/h;洗脫溶劑為5 BV50%的乙醇水溶液,洗脫流速為3 BV/h。芳樟葉粗提液經(jīng)裝填有大孔樹脂DA201的固定床純化后黃酮含量由38.15%提高到91.18%,純化倍數(shù)2.39倍。 采用HPLC法測(cè)定芳樟葉精制黃酮中蘆丁、槲皮素、山奈酚和異鼠李素的含量,分別為123.33 mg/g、70.00 mg/g、28.63 mg/g和20.81 mg/g。利用

5、高效液相色譜—二極管陣列檢測(cè)器—電噴霧質(zhì)譜(HPLC—DAD—ESI—MS)聯(lián)用技術(shù)對(duì)芳樟葉精制黃酮的主要組分進(jìn)行了定性分析,初步鑒定出蘆丁、槲皮素—3—O—β—D—半乳糖苷、山奈酚—3—O—β—D—蕓香糖苷、異鼠李素—3—O—β—D—蕓香糖苷、槲皮素—3—O—β—D—鼠李糖苷、山奈酚—3—O—β—D—鼠李糖苷6種黃酮糖苷。采用Sephadex LH-20凝膠柱從精制黃酮中分離得到蘆丁和山奈酚—3—O—B—D—蕓香糖苷。 進(jìn)一步

6、采用沸水提取、乙醇沉淀的方法,從芳樟葉中提取得到水溶性粗多糖CLPS。經(jīng)DEAE52—纖維素柱和Sephacryl—S400凝膠柱分離得到一種酸性多糖組分CLPS—A2,采用高效凝膠滲透色譜法測(cè)定其為均一性多糖,平均分子量為244KOa。紫外可見吸收光譜和紅外光譜的分析結(jié)果表明CLPS—A2為具有乙酰氨基結(jié)構(gòu)的β型吡喃多糖。CLPS—A2水解產(chǎn)物的分析結(jié)果顯示,CLPS—A2是一種主要由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖組成的酸性雜

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