油菜花粉多糖的分離、純化、結(jié)構(gòu)鑒定及抗氧化活性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、近年來,花粉作為優(yōu)良的全營養(yǎng)食物被全世界廣泛關(guān)注,掀起一股“花粉研究熱”。多年來我國花粉的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究己全面深入地開展,并取得多方面的可喜成果,有些方面己進入國際研究的前沿。 油菜花粉是中國產(chǎn)量最大的花粉,充分利用我國油菜花粉資源,對油菜花粉進行深入系統(tǒng)研究,使這一豐富資源的開發(fā)和利用提高到一個新的水平,將會產(chǎn)生極大的經(jīng)濟和社會效益。油菜花粉多糖具有抗腫瘤、增強免疫等功能,然而目前報道的油菜花粉多糖的最高提取率僅達 1.4

2、50%,為了更好地提高油菜花粉多糖的提取率,本論文采用溫差-機械法、溫差-超聲波法和超微粉碎法三種方法對油菜花粉進行破壁,以期找到最佳的破壁方法。并在系統(tǒng)研究了油菜花粉多糖的提取、分離純化、理化性質(zhì)以及初級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,對其抗氧化的活性功能進行了評價,為今后油菜花粉多糖的研究與開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。本論文主要研究內(nèi)容與結(jié)論如下: 1.測定了油菜花粉中蛋白質(zhì)、脂肪、黃酮、以及幾種金屬元素如Cu、Mg、Fe、Ca、Zn的含量,為油菜花粉的

3、開發(fā)利用提供了科學依據(jù)。測定結(jié)果顯示油菜花粉中蛋白和脂肪含量較高,所測的幾種金屬元素也較豐富。 2.采用溫差-機械法、溫差-超聲波法和超微粉碎法分別對油菜花粉進行破壁,發(fā)現(xiàn)溫差-機械法和溫差-超聲波法破壁效果遠不如超微粉碎破壁,超微粉碎破壁率可高達99%以上。 3.以葡萄糖為對照,優(yōu)選苯酚-硫酸法測定油菜花粉多糖含量的顯色條件。最佳的顯色條件為:取待測油菜花粉多糖2 mL,加入濃度為5%苯酚1 mL,迅速滴加濃硫酸5.0

4、 mL,搖勻后于室溫放置20 min,在482 nm處測定吸光度。 4.對油菜花粉多糖的水提工藝進行了研究,探討提取溫度、提取時間、料液比和提取次數(shù)對多糖提取率的影響。在單因素試驗的基礎(chǔ)上,通過正交試驗確定最佳提取工藝條件。結(jié)果表明提取溫度對多糖提取率的影響最大,其次為提取時間、次數(shù),料液比的影響最小。油菜花粉多糖提取的最優(yōu)條件為:提取溫度為70℃,提取時間為4 h,提取次數(shù)2次,料液比為1:8,此時多糖提取率達4.48%。

5、 5.比較Sevag法和TCA法對油菜花粉多糖脫蛋白的效果。實驗結(jié)果表明TCA法對油菜花粉多糖中蛋白的脫除率遠高于Sevag法,并且多糖的損失率也低于Sevag法。 6.用DEAE-纖維素對油菜花粉精制多糖進行初步分離,主要得到中性多糖D<,1>和酸性多糖D<,3>兩個組分。再用Sephacryl S-200柱層析分別對多糖D<,1>和D<,3>進一步分離純化得到中性多糖D<,11>和酸性多糖D<,31>,用Sephacry

6、l S-300柱層析和HPLC法分別鑒定其純度,結(jié)果顯示只有D<,11>組分為純度很高的均一多糖。采用凝膠過濾法測定多糖D<,11>的分子量為80271,通過GC分析多糖D<,11>與D<,31>的單糖組成,結(jié)果表明它們均至少由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖六種單糖組成。UV檢測顯示油菜花粉多糖D<,11>于280 nm處未見有核酸和蛋白特征吸收峰,經(jīng)IR檢測證實多糖D<,11>與D<,31>具有多糖類物質(zhì)的特征吸收峰。

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