1、 分類號(hào)：R34 學(xué)校代碼：10392 學(xué)科專業(yè)代碼：071010 學(xué)號(hào)：2120101615 碩士研究生畢業(yè)論文 碩士研究生畢業(yè)論文 鈣通道蛋白 鈣通道蛋白 STIM1&Orai1 對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲作 對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲作用的初步研究 用的初步研究 Effects of Calcium Channel Protein STIM1&Orai

2、1 on the Proliferation and Invasion of Human Liver Cancer 學(xué) 位 類 型： 型： 理學(xué)碩士 理學(xué)碩士 所 在 學(xué) 院： 院： 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 申 請(qǐng) 人 姓 名： 楊海洋 楊海洋 學(xué) 科 、 專 業(yè)： 業(yè)： 生物化學(xué)與分子生物學(xué) 生物化學(xué)與分子生物學(xué) 導(dǎo) 師： 師： 林德馨 林德馨 教授 教授 研 究 起 止 日 期 ： 研 究

3、起 止 日 期 ： 2013 2013 年 7 月至 月至 2015 2015 年 3 月 答辯委員會(huì)主席： 答辯委員會(huì)主席： 鄭志竑 鄭志竑 教授 教授 答 辯 日 期 ： 期 ： 2015 2015 年 月 日 二○一五 ○一五年六月 福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 目 錄 英文縮略詞釋義表……………………………………………………4 中文摘要………………………………………………………………6 英文摘要…………………

4、……………………………………………7 引言……………………………………………………………………9 第一部分 第一部分 STIM1/Orai1 慢病毒載體 慢病毒載體的構(gòu)建 的構(gòu)建 材料和方法 材料和方法…………………………………...……………………….11 1. 實(shí)驗(yàn)材料...................................................................................

5、11 1.1 主要儀器設(shè)備.......................................................................11 1.2 細(xì)胞株...................................................................................11 1.3 主要試劑.............................

6、..................................................11 1.4 主要試劑的配制...................................................................12 2. 實(shí)驗(yàn)方法..............................................................................

7、.....14 2.1 質(zhì)粒載體的構(gòu)建...................................................................14 2.2 載體慢病毒包裝及感染.......................................................17 2.3 Weatern Blot 法檢測(cè)定 STIM1、Orai1 蛋白....................

8、..17 2.4 免疫熒光方法分析細(xì)胞定位...............................................19 2.5 胞內(nèi)游離鈣水平變化的檢測(cè)...............................................19 結(jié)果 結(jié)果…………………………..…………………………………..……20 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果.....................................

9、..............................................20 3.1 重組質(zhì)粒載體的鑒定...........................................................20 3.2 病毒感染效檢測(cè)...................................................................23 3.3 感染前后 STI

10、M1/Orai1 蛋白表達(dá)檢測(cè)...............................23 3.4 外源 STIM1&Orai1 蛋白在胞內(nèi)的定位.............................26 3.5 細(xì)胞胞內(nèi)鈣水平變化檢測(cè)...................................................26 4.小結(jié).................................