HMGA1基因啟動子克隆及活性區(qū)域的分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本課題研究的目的在于獲得HMGA1基因啟動子序列,并對其活性序列進行分析,明確HMGA1基因啟動子在人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC-12)和人乳腺癌MCF-7細胞中的活性中心序列;同時觀察HMGA1對高糖誘導的HUVEC-12細胞凋亡的影響。
　　方法:采用 PCR技術克隆 HMGA1基因啟動子序列,構建一系列不同長度的HMGA1啟動子熒光素酶報告基因載體,分別轉染至HUVEC-12和MCF-7細胞中,以熒光素酶報告系統(tǒng)分析鑒

2、定HMGA1基因啟動子的主要活性區(qū)域。構建HMGA1表達質粒,將其轉染至HUVEC-12細胞,利用流式細胞術觀察 HMGA1對高糖誘導的HUVEC-12細胞凋亡的影響。
　　結果:1)成功構建了HMGA1基因轉錄起始位點上游1367、1024、598及256bp片段的雙熒光素酶報告基因質粒載體,發(fā)現(xiàn) HMGA1基因轉錄起始位點上游256bp序列在MCF-7細胞顯示出較高啟動子活性,而在HUVEC-12細胞中其轉錄起始位點上游598

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