1、豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)引起的以腹瀉、嘔吐、脫水和哺乳仔豬高死亡率為特征的一種高度接觸性腸道傳染病。PED在世界許多養(yǎng)豬國家普遍存在，給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重經(jīng)濟損失。本文旨在探究PEDV感染仔豬的體液與細(xì)胞因子免疫應(yīng)答特征，為深入闡明PED的感染免疫機制奠定基礎(chǔ)。
　　將16頭21日齡健康仔

2、豬隨機分為PEDV感染組和對照組，每組8頭。感染組:每頭仔豬口服PEDV HBMC/2012株15mL(TCID50=1056/mL);對照組:每頭仔豬口服等體積的細(xì)胞維持液。感染后不同時間應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測各組豬的十二指腸、空腸和回腸中的PEDV特異IgM、IgA、IgG抗體分泌細(xì)胞;應(yīng)用ELISA檢測小腸黏液中PEDV-N、-S1和-S2蛋白特異性IgA抗體，血清中PEDV-N、-S1和S2蛋白特異性IgM、IgA、IgG抗體，以

3、及血清和外周血淋巴細(xì)胞(PBLC)分泌的炎癥因子（IL-6、IL-18、IL-12、IL-1α、IL-1β和TNF-α）、趨化因子（MIP-1α、IP-10、CXCL11、IL-8、MIG和MIP-1β）、轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β1、-β2和-β3）和干擾素（IFN-α、-β和-γ）的表達(dá)水平;感染后3d(dpi)，應(yīng)用基因芯片技術(shù)分析回腸和腸系膜淋巴結(jié)內(nèi)主要細(xì)胞因子基因表達(dá)譜，并通過實時熒光定量PCR驗證基因芯片檢測結(jié)果。
　　

4、感染后3d，除空腸外，在回腸和十二指腸中均檢測到少量PEDV特異性IgM、IgA、IgG抗體分泌細(xì)胞，28dpi，在回腸、十二指腸、空腸均未檢測到上述抗體分泌細(xì)胞;感染后3d和28d，在小腸黏液中沒有檢測到特異性IgA抗體。血清N、S1和S2蛋白特異性IgM、IgA、IgG抗體動態(tài)和水平不同，其中IgG抗體水平高于IgM和IgA，持續(xù)時間長。相對于S1和S2蛋白，N蛋白特異IgG抗體水平較低。3dpi血清中出現(xiàn)特異性中和抗體，14dpi

5、中和活性最強，隨后迅速下降。該結(jié)果表明，PEDV感染仔豬腸道局部黏膜體液免疫應(yīng)答水平較低，血清特異性IgM水平低，IgG水平高且持續(xù)時間長，IgA和中和抗體持續(xù)時間短暫。
　　與對照組相比，感染初期血清炎癥因子（IL-6和IL-12）水平顯著降低，趨化因子（CXCL11、MIG、MIP-1α和MIP-1β）、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β1/β3)以及IFN-α水平顯著升高，IFN-β含量下降;體外用PEDV刺激感染仔豬的PBLC后，炎

6、癥因子（IL-1α和TNF-α）、趨化因子（IL-8、IP-10、CXCL11和MIP-1β）、轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β2含量明顯升高，而干擾素（IFN-α/-β/γ）水平無變化。感染后3d，回腸內(nèi)IL-6、IL-8、IL-1β、MIP-1β、MCP-1基因表達(dá)水平顯著升高，腸系膜淋巴結(jié)的相應(yīng)細(xì)胞因子基因表達(dá)水平無明顯變化。該結(jié)果表明，PEDV引起了仔豬腸道局部和全身明顯的炎癥反應(yīng)和趨化反應(yīng)，不能充分誘導(dǎo)干擾素應(yīng)答反應(yīng)。
　　綜上所