1、豬流行性腹瀉(porcine epidemic diarrhea，PED)是由豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemicdiarrhea virus，PEDV)引起的一種嚴重的病毒性傳染病。該病的特征是可以導致哺乳仔豬發(fā)生嚴重的腹瀉、嘔吐、脫水，并且致死率極高。本病在歐洲和亞洲傳播非常廣泛，每年都會對一些國家和地區(qū)造成嚴重的經(jīng)濟損失，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的危害。所以對于豬流行性腹瀉的防治是當務之急。對于大多數(shù)的病毒性腹瀉疾病來說，

2、防治措施一般選擇疫苗免疫。雖然人們使用了現(xiàn)有的疫苗來防治豬流行性腹瀉病毒，但是該病毒還是出現(xiàn)在了免疫豬群中。豬流行性腹瀉病毒所造成的損害仍然在持續(xù)加重。近年來，有關豬流行性腹瀉病毒疫苗的研究已經(jīng)取得了一定的進展，但目前所面臨的主要問題是豬流行性腹瀉病毒在種毒制備的過程中，繁殖條件復雜，病毒在細胞中培養(yǎng)的病毒滴度低，這些都嚴重妨礙了豬流行性腹瀉疫苗的研制。
　　 本研究為了提高豬流行性腹瀉病毒的繁殖滴度，對豬流行性腹瀉病毒的培養(yǎng)條

3、件進行優(yōu)化并連續(xù)體外傳代培養(yǎng)，分別從胰酶濃度、吸附時間和培養(yǎng)方式三個方面對豬流行性腹瀉病毒的傳代培養(yǎng)條件進行了摸索。實驗發(fā)現(xiàn)最適的胰酶濃度范圍為1-5μg/mL，并且最適的培養(yǎng)方式為吸附液吸附1.5 h后棄去吸附液，加入維持液培養(yǎng)72 h收毒。通過以上的培養(yǎng)方式最終提高了病毒的滴度(TCID50)，TCID50為106.17/0.1 mLTCID50,從而降低了該病毒的致病性。
　　 本研究進一步對PEDV HLJBY毒株的理化

4、特性的探究，發(fā)現(xiàn)PEDV HLJBY毒株對50℃及以上的溫度敏感，在此溫度以上即可達到熱滅活的效果;該毒株還對氯仿敏感;PEDV HLJBY毒株的pH比較穩(wěn)定,將該毒株的pH調(diào)至3，再調(diào)至原pH值，病毒的滴度并沒有明顯變化。
　　 本研究參照《中華人民共和國獸藥典》2010年版第三部的要求對該病毒的特性進行了系統(tǒng)研究與記錄。根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》的要求進行細胞和種毒的純粹檢查，結(jié)果顯示PEDV培養(yǎng)用Vero細胞和PEDV種