1、冠狀病毒是感染人和動物的一大類病毒。感染人類和動物的冠狀病毒種類多樣而且致病性和免疫特性存在明顯差異。宿主在長期的進化過程中形成了一種抵抗病毒入侵的防御性抗病毒機制，即抗病毒天然免疫反應(innate immune response)。冠狀病毒對宿主抗病毒天然免疫反應的調(diào)節(jié)機制至今不甚清楚。我們前期研究發(fā)現(xiàn)：人類新發(fā)冠狀病毒SARS病毒和NL63病毒木瓜樣蛋白酶(PLP)具有去泛素化酶(DUB)活性，而且是一種宿主干擾素拮抗劑。為了證實

2、DUB活性和對宿主干擾素拮抗特性是所有冠狀病毒木瓜樣蛋白酶都具有的生物學特性，本研究以動物冠狀病毒-豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)作為研究對象。研究發(fā)現(xiàn)PEDV感染宿主后不誘導IFN-β產(chǎn)生并且負調(diào)節(jié)IFN-β表達，同時PEDV抑制核轉(zhuǎn)錄因子IRF3活化通路；推測PEDV可能是通過抑制IRF3通路從而負調(diào)節(jié)宿主抗病毒干擾素表達通路。PEDV非結(jié)構(gòu)蛋白nsp3編碼兩個木瓜樣蛋白

3、酶(PLP)PLP1和PLP2結(jié)構(gòu)域，進一步研究發(fā)現(xiàn)，PEDV PLP1不具有DUB活性，對干擾素也無拮抗作用；PLP2是PEDV編碼的去泛素化酶(DUB)，PLP2對K48和K63連接的多聚泛素化修飾均具有DUB活性，說明PLP2 DUB活性對K48和K63連接的多聚泛素化無底物特異性。同時，將PLP2的蛋白酶催化活性位點C1729、H1888和D1901突變，突變后PLP2 DUB活性明顯被抑制，說明PLP2蛋白酶催化活性位點同時也

4、是其DUB活性關鍵位點。此外，PLP2對仙臺病毒激活的IFN-β表達具有明顯抑制作用，說明PLP2是PEDV編碼的一種干擾素拮抗劑，而且其干擾素拮抗功能與其蛋白酶催化活性密切相關。以上研究提示，PLP2能夠負調(diào)節(jié)干擾素表達通路。那么PLP2是如何對宿主抗病毒干擾素表達通路進行調(diào)節(jié)?研究發(fā)現(xiàn)，PLP2抑制RIG-Ⅰ激活的IFN-β、NF-кB和IRF3通路，并且抑制STING激活的IFN-β和IRF3通路。進一步研究其機制發(fā)現(xiàn)，PLP2能