1、研究背景與目的 鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma，NPC)是我國南方地區(qū)常見的惡性腫瘤之一，放射治療是鼻咽癌的首選治療方式，放療后失敗的主要原因是局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。根據(jù)鼻咽癌臨床生物學(xué)行為差異我們可以將鼻咽癌的治療分型分為以下四種：輻射敏感不易轉(zhuǎn)移型，輻射敏感易轉(zhuǎn)移型，輻射抗拒不易轉(zhuǎn)移型，輻射抗拒易轉(zhuǎn)移型。如何根據(jù)鼻咽癌的臨床生物學(xué)行為有針對性地開展個體化治療是提高鼻咽癌5年生存率和改善生活質(zhì)量的重要一

2、環(huán)，也是臨床亟待解決的問題。而采用靈敏的預(yù)后指標(biāo)準(zhǔn)確地評估疾病及其生物學(xué)行為是實(shí)行個體化方案治療至關(guān)重要的一步。 DNA雙鏈斷裂(DNA double-strand break，DSB)是電離殺滅腫瘤細(xì)胞的主要機(jī)制，而同源重組(hoomologous recombination，HR)和非同源性末端連接(DNA nonhomologous end-jioining，NHEJ)是DSB的兩條重要修復(fù)途徑。DNA依賴性蛋白激酶(DN

3、A dependent protein kinase，DNA-PK)是NHEJ的主要成分，在DSB中發(fā)揮著重要作用。DNA-PK由Ku70、Ku80、DNA-PKcs三個亞基組成。催化亞基DNA-PKcs可磷酸化ligase Ⅳ、XRCC4從而使得它們活化發(fā)揮連接DSB作用。Ku為DNA-PK的調(diào)節(jié)亞基，在DSB修復(fù)中起著辨認(rèn)、結(jié)合排列DNA末端并招募催化亞基DNA-PKcs的作用。它由分子量為70kD的Ku70和80-87kD的Ku8

4、0(又叫Ku86)組成，任意一個組份缺陷均會導(dǎo)致DNA-PK活性喪失，而致放射敏感性增加。本課題組一直以來對DNA-PK做了大量的研究工作，并經(jīng)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)DNA-PK的表達(dá)與鼻咽癌的放射敏感性密切相關(guān)。但在復(fù)雜的人體腫瘤中，DNA-PK．表達(dá)如何，其與預(yù)后是否有關(guān)，能否指導(dǎo)臨床的診斷和治療?這是臨床工作者最關(guān)心的問題，也是本研究所要解決的問題。本研究旨在通過檢測211例鼻咽癌組織中DNA-PK三亞基Ku70、Ku80、DNA-PKcs

5、的表達(dá)情況，并探討其與鼻咽癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。 材料與方法1.收集1994年7月至1999年12月在中山大學(xué)腫瘤防治中心治療的鼻咽癌病例211例?；颊叩哪挲g為13～68歲，中位年齡為48歲。 2.采用免疫組化SP法檢測上述患者鼻咽癌組織中DNA-PK的3個亞基Ku70、Ku80、DNA-PKcs的表達(dá)情況，據(jù)評分結(jié)果將其分為高表達(dá)和低表達(dá)兩組(陰性表達(dá)歸入低表達(dá)組)。 3.結(jié)合患者的臨床及預(yù)后資料，用SP

6、SS13.0軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。應(yīng)用Spearman相關(guān)性分析Ku70、Ku80、DNA-PKcs之間表達(dá)的關(guān)聯(lián)性；用Pearson卡方檢驗(yàn)分析Ku70、Ku80、DNA-PKcs及三者共同高表達(dá)與鼻咽癌臨床病理特征之間的關(guān)系；應(yīng)用Kaplan-Meier作單因素分析，log-rank檢驗(yàn)分析生存曲線的差異；以Cox模型進(jìn)行多因素生存分析。P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 研究結(jié)果 1.Ku70在鼻咽癌組織中高表達(dá)

7、的有136例，高表達(dá)率為64.5％；Ku70的表達(dá)水平與患者的性別、年齡、病理類型、N分期及M分期的相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與T分期有關(guān)(P＜0.05)；單因素生存分析顯示，Ku70高表達(dá)組總生存率、無瘤生存率、無復(fù)發(fā)生存率、無轉(zhuǎn)移生存率均低于Ku70低表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；多因素分析顯示Ku70是鼻咽癌總生存和無復(fù)發(fā)生存的獨(dú)立影響因素(P＜0.05)，而非無瘤生存和無轉(zhuǎn)移生存的獨(dú)立影響因素(P＞0.05

8、)。 2.Ku80在鼻咽癌組織中高表達(dá)的有95例，高表達(dá)率為45.0％。Ku80表達(dá)高低與患者的性別、年齡、病理類型無顯著相關(guān)(P＞0.05)，與N分期、M分期有關(guān)(P＜0.05)。單因素生存分析顯示，Ku80高表達(dá)組總生存率、無瘤生存率、無復(fù)發(fā)生存率、無轉(zhuǎn)移生存率均低于低表達(dá)組，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)； 3.DNA-PKcs在鼻咽癌組織中高表達(dá)的有80例，高表達(dá)率為37.9％；DNA-PKcs表達(dá)高低與患

9、者的性別、年齡、病理類型及N分期的相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與T分期、M分期有關(guān)(P＜0.05)；單因素生存分析顯示，DNA-PKcs高表達(dá)組總生存率、無瘤生存率、無復(fù)發(fā)生存率、無轉(zhuǎn)移生存率均低于低表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；多因素分析顯示DNA-PKcs表達(dá)水平是鼻咽癌總生存、無瘤生存、無復(fù)發(fā)生存、無轉(zhuǎn)移生存的獨(dú)立影響因素(P＜0.05)。 4.Spearman相關(guān)性分析顯示鼻咽癌組織中Ku70、Ku8

10、0、DNA-PKcs三者表達(dá)兩兩之間呈高度正相關(guān)(P＜0.01)；三者共同高表達(dá)的有57例，高表達(dá)率為27.0％；卡方檢驗(yàn)顯示，三者共同高表達(dá)與患者的性別、年齡、病理分型的相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與T分期、N分期、M分期有關(guān)(P＜0.05)；單因素生存分析顯示，三者共同高表達(dá)組總生存率、無瘤生存率、無復(fù)發(fā)生存率、無轉(zhuǎn)移生存率均低于非共同表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；多因素生存分析顯示三者共同高表達(dá)是鼻咽癌總生存、

11、無瘤生存、無復(fù)發(fā)生存、無轉(zhuǎn)移生存的獨(dú)立影響因素(P＜0.05)。 結(jié)論與討論 1.Ku70表達(dá)高低與鼻咽癌的T分期高低有關(guān)；初步研究認(rèn)為Ku70表達(dá)高低與鼻咽癌的復(fù)發(fā)有關(guān)，是評價鼻咽癌患者復(fù)發(fā)與否的有用指標(biāo)。 2.Ku80表達(dá)高低與鼻咽癌的N分期和M分期高低有關(guān)，即與鼻咽癌的轉(zhuǎn)移行為有關(guān)，但尚未發(fā)現(xiàn)Ku80表達(dá)與鼻咽癌預(yù)后存在顯著相關(guān)性，有必要擴(kuò)大樣本進(jìn)一步深入研究。 3.DNA-PKcs表達(dá)高低與鼻咽癌