1、目的：Legumain是最近新發(fā)現(xiàn)的一個半胱氨酸內(nèi)肽酶家族新成員，在惡性實體腫瘤中高表達(dá)，與惡性腫瘤的浸潤、侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)。目前國內(nèi)外尚未見關(guān)于Legumain與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的相關(guān)研究報道。本研究利用分子生物學(xué)技術(shù)檢測Legumain在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)及其與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系和對預(yù)后生存的影響，旨在為視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的臨床預(yù)后判斷尋找一個新的指標(biāo)，幫助辨認(rèn)高危瘤，以便更好的指導(dǎo)

2、臨床治療。
　　 材料與方法：應(yīng)用RT-PCR、Western-Blot和免疫熒光技術(shù)對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Y79和WERI-Rb-1細(xì)胞系中Legumain的表達(dá)情況進行檢測；應(yīng)用免疫組化染色法對1999年1月-2009年12月在天津市眼科醫(yī)院就診并行眼球摘除術(shù)的106例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤病理組織切片進行Legumain染色，同時收集患兒各項臨床病理特征，進行病理切片復(fù)習(xí)，根據(jù)患兒的不同情況采取不同的方式進行預(yù)后隨訪，利用SPSS16.

3、0軟件，通過卡方檢驗分析Legumain表達(dá)情況與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤患兒的臨床病理特征之間的關(guān)系，用Kaplan-Meier法及Log-rank檢驗進行單因素生存分析初步篩選與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤預(yù)后相關(guān)的風(fēng)險因素。
　　 結(jié)果：在mRNA和蛋白水平上，Legumain在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Y79和WERI-Rb-1細(xì)胞系中均有表達(dá)，而Y79細(xì)胞系中Legumain在基因和蛋白水平上的表達(dá)均高于WERI-Rb-1細(xì)胞系。通過對106例視網(wǎng)膜母細(xì)

4、胞瘤組織進行免疫組化染色發(fā)現(xiàn)，有26例切片Legumain呈陰性表達(dá)，42例呈弱陽性表達(dá)，38例呈強陽性表達(dá)，Legumain陽性表達(dá)率為75％，在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞中可見Legumain強陽性表達(dá)。當(dāng)腫瘤侵犯視神經(jīng)時，視神經(jīng)纖維的Legumain表達(dá)明顯增高。通過統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，Legumain表達(dá)水平與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤患兒的病程、有無眼部組織浸潤特別是視神經(jīng)侵犯程度密切相關(guān)（p<0.05），而與性別、眼別、患兒的初診年齡

5、、臨床分期、病理組織分化程度以及脈絡(luò)膜浸潤程度無關(guān)（p>0.05）；視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤患兒的預(yù)后與Legumain表達(dá)水平、患兒的初診年齡、病程、臨床分期以及視神經(jīng)侵犯程度有關(guān)（p<0.05）。
　　 結(jié)論：Legumain在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系和組織中均有表達(dá)，Legumain表達(dá)水平與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤眼部組織的浸潤程度尤其是視神經(jīng)侵犯程度密切相關(guān)，同時Legumain的表達(dá)水平與患兒的預(yù)后有關(guān)聯(lián)性，Legumain的表達(dá)水平可以作