1、目的:探討H9C2細胞培養(yǎng)液對骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstem cells，MSCs)分化為心肌樣細胞的誘導作用。
　　方法:運用全骨髓貼壁篩選法分離培養(yǎng)大鼠MSCs，制備H9C2細胞培養(yǎng)液作為誘導培養(yǎng)液，將MSCs誘導培養(yǎng)1、3、5、7天。以表達心肌特異性標志物的H9C2細胞為陽性對照組，以H9C2細胞培養(yǎng)液誘導得MSCs為分化實驗組，以未處理的MSCs為陰性對照組;對各組細胞及MSCs增殖分化細胞進行心肌細胞特

2、性檢測，即用免疫熒光法和western-blot檢測其肌鈣蛋白T(cTnT)、心肌細胞結(jié)蛋白(desmin)的表達，用實時熒光定量PCR(RT-PCR)檢測其心肌細胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重鏈(a-MHC)和β-心肌肌球蛋白重鏈(β-MHC)mRNA的表達。
　　結(jié)果:
　　1 H9C2細胞培養(yǎng)液誘導MSCs培養(yǎng)7天，免疫熒光技術檢測各組細胞中肌鈣蛋白T的表達，MSCs增殖分化細胞中cTnT陽性細胞達0.179±0.01

3、1，顯著高于對照組(P＜0.05)。
　　2 H9C2細胞培養(yǎng)液誘導MSCs培養(yǎng)7天，western-blot檢測各組細胞中肌鈣蛋白T、desmin的表達，westem-blot檢測誘導培養(yǎng)MSCs后分化細胞cTnT蛋白表達明顯上調(diào)(P＜0.05)，desmin表達明顯上調(diào)(P＜0.05)。
　　3 H9C2細胞培養(yǎng)液誘導MSCs培養(yǎng)7天，RT-PCR檢測各組細胞中a-MHC與β-MHC mRNA表達，RT-PCR檢測分化細