1、在爪蟾和斑馬魚中,Kaiso是一種在整個基因組范圍內(nèi)與甲基化CpG序列特異性結(jié)合的轉(zhuǎn)錄抑制因子,在調(diào)控被甲基化基因表達的時間模式中起重要的作用。為深入研究DNA甲基化對我國重要養(yǎng)殖魚類生殖和發(fā)育的影響,我們克隆了鯽魚Kaiso基因的cDNA序列,并對其時空表達模式進行了分析。該cDNA全長3145bp,5'-非翻譯區(qū)132 bp,3'-非翻譯區(qū)1117 bp,開放閱讀框1896bp,編碼631個氨基酸。鯽魚Kaiso蛋白與其他物種Kai

2、so蛋白的同源性分析表明,與其他物種一樣,其N端和C端分別有高保守性的BTB/POZ結(jié)構(gòu)域和鋅指結(jié)構(gòu)域。整胚原位雜交結(jié)果顯示,Kaiso mRNA在早期胚胎發(fā)育的各個時期均廣泛表達,信號均一,但從尾芽期開始出現(xiàn)組織特異性表達差異。對不同發(fā)育階段胚胎的實時定量PCR檢測結(jié)果表明:卵子中有高豐度的母源Kaiso mRNA存在;在卵裂期至囊胚中期胚胎中Kaiso mRNA的豐度逐漸降低;從囊胚中期至原腸早期都維持在最低水平狀態(tài);原腸后期其表達

3、水平又逐漸升高,至尾芽期達到與未受精卵中相當(dāng)?shù)母咚胶笤谄鞴侔l(fā)生期的整體水平又稍有下降。Kaiso mRNA豐度的在胚胎發(fā)育早期的這種變化過程提示在卵裂期檢測到的mRNA可能都是母源mRNA,合子核Kaiso基因可能是在囊胚晚期后才開始轉(zhuǎn)錄。對成體不同組織的實時定量PCR檢測結(jié)果表明Kaiso的表達存在明顯的組織特異性差異,在鯽魚肌肉、視網(wǎng)膜、心臟和腦中表達水平較高,而在腎、胰、肝等器官中表達水平很低。Kaiso表達的時間和組織特異性提